Tol2轉座子
提及轉基因，大家首先映入腦海的是什么呢？轉基因大豆？玉米？食用油？（對于那些一個都想不到的孩紙們，小編我只想哭暈在廁所）名詞很熟悉，各大超市隨處可見，可何為轉基因，如何得到轉基因產品？今天小編簡單來跟大家聊一聊。
所謂轉基因，顧名思義，就是外源基因整合進入宿主基因組，目前哺乳動物系統最常用的轉基因技術主要包括Sleeping beauty(SB)，PiggyBac(PB)以及Tol2轉座子系列，然而，其中的“明星轉座子”當屬Tol2！
1、Tol2轉座機制
Tol2轉座子是Koga等人在日本青鳉魚中發現，屬于hAT轉座子家族，全長4682bp，末端分別為17bp和19bp的反向重復序列，包含4個外顯子（圖1），編碼蛋白含有649個氨基酸殘基。
Tol2作為一個自主的轉座元件，自身可以編碼轉座酶，且迄今為止，是在脊椎動物中發現的唯一具有自主轉座活性的轉座子[1]。將轉座酶編碼區序列部分缺失， 但保留轉座酶識別和結合區域序列，Tol2便無法發生自主轉座（圖1）。
圖1 Tol2轉座子序列[1]
利用這一特性，可以以外源基因替代轉座酶編碼序列，構建Tol2轉座載體，與轉座酶cDNA載體質粒共轉入宿主細胞，外源基因便會以“剪切-粘貼”的方式整合入基因組中且不會引起任何靶位點的重排和修飾[2], 如圖2.
圖2 Tol2轉座機制[2]
2、Tol2應用
Tol2轉座子具有不定向性，即在基因組中是隨機插入，并無序列特異性，那既然Tol2都如此任性了，留之何用呢？
起初，科學家們利用這一特性，將其作為基因捕獲和增強子捕獲的工具以進行突變體篩選，從而確定機體發育過程中重要功能基因的突變體。但隨著科學技術的不斷進步，自動化的基因高通量篩選鑒定早已不在話下，以為tol2會就此淘汰？不存在的！如今的tol2轉座子依舊在建立穩定基因表達細胞系和轉基因大、小鼠的制備等方面發揮著其獨特的技術優勢。