特點
1.逆流色譜不用固態支撐體,完全排除了支撐體對樣品組分的吸附、玷染、變性、失活等不良影響。所以,能避免不可逆吸附所造成的溶質色譜峰拖尾現象能實現很高的回收率。例如,對于黃酮等易被填料吸附的物質的分離與制備就具有明顯的優勢。
2.逆流色譜的分配分離是在旋轉運動中完成的,兩相溶劑都被劇烈振動的離心力場依其界面特征見成極微小的顆粒,樣品各組分會在兩相微粒的極大表面上分配,并且能在顆粒振蕩與對流的環境中有效地傳遞。所以,它就象是把通常的溶劑萃取過程成千上萬次地、高效地、自動連續地予以完成。
3.沒有填料在柱內的占空體積,逆流色譜的分離柱又容易做得容積大些,柱內空間全部是有效空面。所以,它的樣品負載能力很強,制備量很大,而且重視性很好。
4.逆流色譜不用填料,分離過程不是淋洗或洗脫過程,而是對流穿透過程。所以,能節省昂貴的材料消耗和溶劑消耗,運行使用的后續投入較低。
逆流色譜的分離效率比不上氣相色譜和高效液相色譜等技術,不適宜用它去完成組成復雜的混合物的全譜分離分析。而它對于樣品預處理條件的放松,以及它的回收率高,制備量大的優點,作為特定部位和特定組分的分離純化與制備則是十分可取的。
發展概況
逆流色譜的基本模型早在20世紀60年代就由Dr.YoichiroIto創立,經過數10年在美國國家健康研究院(NIH)的實驗室研究,特別是在近20年,高速逆流色譜技術(High-SpeedCCC,HSCCC)的出現,使它進入了在世界范圍內推廣應用的階段。每年一度的美國匹茲堡國際分析化學與應用光譜學學術會議上,都設有CCC的專題組:“JournalofLiquidChromatography”等重要學術刊物曾多次出版這一技術的論文專輯。近10年間,HSCCC在生物化學、醫藥學、農業、環境、材料、化工、海洋生物以及無機離子等眾多領域的成功應用,使之成為一種引入注目的技術手段。2000年9月,逆流色譜技術國際委員會在英國Brunel大學召開了此技術的第一屆國際學術會議CCC-2000。
1978年,當時任我國衛生部藥品生物制品檢定所所長的周海韻教授,從世界衛生組織的資料中獲知Dr.Ito正在美國NIH研究開發實現逆流色譜的設備,并已用于抗生素異構體的分離。周先生建議筆者研制此種設備以配合我國的抗生素質檢工作。1980年,我們研制出了我國第一臺逆流色譜儀,并由檢定所抗生素室用于抗生素成分的分離與分析檢定。在蔡定國教授等植物藥學專家的幫助與合作下,完成了首打批生物學堿、黃酮等類中藥成分的分離應用研究,其結果引起了國內外的關注。這些工作,確立了我國在CCC技術及其應用研究方面的國際領先地位。1987年,張天佑教授應美國NIH邀請,赴美同Dr.Ito合作從事CCC技術及相關生物工程技術的研究,共同推進了HSCCC技術的發展并獲得美國發明ZL。張天佑教授、蔡定國教授、中國醫學院藥物所方起程教授、華西醫科大學藥學院消悼英教授、消蓉教授等人,發表了一批用HSCCC分離制備天然藥物活性成分的論文,為形成我國CCC技術在這一應用研究領域的國際領先優勢和技術特色打下了基礎。近10年來,我國關于CCC技術的研究開發工作始終同天然產物的研究開發工作密切地結合著。