實驗儀器
控溫搖床水浴鍋 冰箱（-20,‐70℃） 超凈工作臺 培養箱
實驗試劑
Amp LB IPTG X-Gal
平皿 玻棒 三角瓶 離心管 移液器 tip
實驗步驟：
20人／班 1平皿／人
挑取可疑的白色菌落，移植于2mL的LB中，250轉/分搖菌、37℃培養過夜。以快速堿法抽提質粒：
1. 取適量菌液于2ml指形管中，12000rpm/min 離心30s-1min。
2.棄上清，且用濾紙吸干。
3.加溶液I 100μL，重懸菌體（使細菌重新溶解）。振蕩。
溶液I：含葡萄糖，作用形成粘度和滲透壓。
含EDTA，作用是能絡合Mg+、Ca ++，抑制DNA酶活性。
含Tris-HCL，作用作為平衡鹽。含溶菌酶，作用是溶解細胞壁。
4. 加溶液II 200μL，反復倒轉輕搖。
溶液II：含NaOH+SDS（現配現用）。作用：使溶液PH值達到12.4左右，使核酸變性，而質粒變性不嚴重。同時SDS能使蛋白質溶解。
5. 加溶液III 150μL，倒轉輕搖勻。
溶液III：含KAC、HAC其作用是使溶液PH達到中性，染色體退火形成網狀，而質粒還原成螺旋狀，溶解在水中。
6.12，000r離心5分鐘。
7.轉移上清至另一指形管。
8.加等體積平衡酚（PH7.6以上，用Tris-NaOH調），猛烈搖勻， 12，000r離心5分鐘。
9.小心轉移上清至另一指形管。
10.加1/2體積平衡酚和1/2體積氯仿：異丙醇（氯仿：異丙醇為 24：1），混勻，12，000r離心5分鐘。
11.重復9
12.加等體積氯仿：異丙醇抽提，12，000r離心5分鐘。
13. 重復9
14.加1/10體積的3M NaAc（PH5.2）和2.5體積的無水乙醇，混勻。冰浴若干時間（時間可長可短）。NaAc使質粒（帶負電）電荷減弱，易沉淀。
15.12，000r，15 分鐘。
16.棄上清，用75%乙醇1ml洗沉淀。作用：去鹽。
17.離心12，000r，5分鐘。
18.棄上清，風干殘留液。
19.加含有RNase的雙蒸水30-50μL，溶解沉淀。
20.室溫作用若干時間，電泳檢測或置冰箱結冰層備用。
結果與分析:
根據提取質粒酶切后的電泳圖譜, 具體分析是否有插入片段; 有插入片段的為重組子。