方法名稱：阿魏酸的測定—高效液相色譜法
應用范圍：該方法采用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量。
方法原理：供試品水浴蒸至近干，加甲醇進行熱回流提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，以稀鹽酸調pH=1~2，煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取，乙醚提取液再用2%碳酸鈉提取，碳酸鈉提取液用乙酸乙酯洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調pH=1~2,用乙醚提取，乙醚提取液蒸干，殘渣加甲醇溶解，過濾，濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處檢測阿魏酸的吸收值，計算出其含量。
試劑：1.甲醇（色譜純）
2.乙酸
3.乙醚
4.碳酸鈉
5.鹽酸
儀器設備：1. 儀器
1.1高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
Shim-Pack CLC-ODS分析柱（150×4.6mm，5μm），理論板數按阿魏酸峰計算為4000。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相：甲醇 : 1%乙酸水 = 28:72
2.2 檢測波長：323nm
2.3柱溫：室溫
試樣制備：1. 稱取供試品
精密吸取該品25mL。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取阿魏酸對照品30mg，置50mL量瓶中，加甲醇溶解，并加至刻度，混勻。精密吸收5mL置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，得對照品溶液。
3.供試品溶液的制備
供試品水浴蒸至近干，加甲醇加熱回流提取2次，每次50mL，回流30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40mL溶解，以稀鹽酸調pH=1~2，煮沸，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚20、10、10、10mL提取4次，合并乙醚液，用2%碳酸鈉20、10、10、10mL提取4次，合并提取液，用乙酸乙酯25mL洗滌，棄去洗滌液，堿液用稀鹽酸調pH=1~2，以乙醚20、10、10、10mL提取4次，合并乙醚液,40~45℃蒸干，殘渣精密加甲醇2mL溶解，作為供試品溶液。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟：1. 標準曲線繪制
精密吸取上述對照品溶液2、8、12、16、20μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處測定阿魏酸的吸收值，以進樣量對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。
2. 供試品的測定
精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長323nm處測定阿魏酸的吸收值，計算出其含量。