面粉中過氧化苯甲酰紫外分光光度測定法
摘要：本論文利用原子態氫將面粉中過氧化苯甲酰還原成苯甲酸并提取出來，采用紫外分光光度法對其進行測定。該方法的最低檢出濃度為6.5mg/kg，加標回收率在89.3-97.7%之間，6次重復測定的變異系數為3.4%，與本實驗室研究的氣相色譜法相比對，采用t檢驗法對實際樣品進行了分析，結果表明兩方法沒有顯著差異。
關鍵詞：過氧化苯甲酰；面粉；紫外分光光度法
本文為間接法測定BP，采用鐵粉與鹽酸反應產生的原子態氫還原BP成苯甲酸，利用紫外分光光度法測定苯甲酸的吸光度，從而推算面粉中BP的添加量。本法操作簡便，乙醚用量少，易推廣。
1 實驗部分
1.1 主要試劑
BP標準溶液：BP易爆炸，需貯存在水中保存，用時取出，晾干，于硫酸干燥器中放置至少24h。精確稱取0.1g，用丙酮溶解并定容100ml，放置冰箱保存。
1% NaHCO3/5%NaCl：用5%NaCl作溶劑，配制1% NaHCO3。
乙醚；鐵粉；濃鹽酸。所用試劑均為分析純。
1.2主要儀器
紫外分光光度計（附帶石英槽）、水浴振蕩器
1.3操作方法
稱取10g面粉于具塞三角瓶中，加入鐵粉，10-20粒玻璃珠，乙醚，振搖，加入鹽酸，回旋振搖，用少量乙醚沖洗瓶壁，放置過夜。振蕩后沉淀傾濾，再加乙醚于三角瓶中，重復上述操作，如此洗3次。最后用少量乙醚沖洗漏斗，合并乙醚層，用NaCl水溶液洗2次，棄去水相，乙醚層用1% NaHCO3/5%NaCl溶液提取2次，提取液合并于250ml三角瓶中，加鹽酸酸化，于水浴振蕩器上加熱振蕩，冷卻，用蒸餾水轉移至100ml溶量瓶中，定容。于230nm測定吸光度。同時做試劑空白，以試劑空白調零。
工作曲線：移取標準溶液0.25，0.50，0.75，1.00，1.25ml，(相當于每毫升含BP2.5，5.0，7.5，10.0，12.5ug)于具塞三角瓶中，以下按“加入鐵粉—”操作。
1.4計算方法
BP含量(mg/kg)=(A×V×100)/ (M×100)-K
式中： A—從工作曲線上查出的樣品溶液濃度，ug/ml
V—樣品溶液定容體積，ml
M—樣品質量，g
K—校正值
2結果與討論
2.1 測定波長的選擇
以試劑空白調零，通過對苯甲酸、過氧化苯甲酰、樣品溶液在220-260nm波長范圍內掃描分析見圖1，發現3種溶液均在230nm處有一尖峰，由此可確定苯甲酸在230nm處有最大吸收峰，經過處理的BP溶液和被測樣品在230nm處也有最大吸收峰。因此我們選擇230nm作為波長。
2.2干擾因素考察
將實驗中所涉及的化合物在230nm處測其吸光度，結果見表1。
由表1可知，氯化鈉不影響測定，而乙醚和氯化亞鐵均干擾測定。因此在樣品前處理過程中采取以下措施來減少干擾：第一，以氯化鈉水溶液代替水作溶劑，這樣既不干擾測定又可降低水相與乙醚相的互溶程度，同時可緩解樣品處理過程中的乳化程度，有利于操作。第二，用食鹽水洗去氯化亞鐵。結果表明，這些措施顯著地改善了樣品測定的精密度和準確度。
2.3工作曲線及其精密度的測定
BP工作曲線測定見表2。由表2可知，工作曲線的相關系數為0.999，線性良好。通過4次工作曲線的測定，其斜率的變異系數為3.0%，說明工作曲線的重現性和穩定性很好。
2.4 最低檢出濃度的測定
根據國際理論與應用化學家聯合會(IUPAC)規定，我測定了16個全試劑空白，按3S/B計算出方法的檢出限為0.65ug/ml，面粉中最低檢出濃度為6.5mg/kg。面粉中允許添加量為60mg/kg，因此完全可以滿足實際工作要求。
2.5 校正值(K)的初步探索
眾所周知，許多物質的紫外光區均有吸收，面粉提取液中的其它有機物也會在230nm處有微弱的光吸收。通過掃描圖譜可知，這些物質不會干擾苯甲酸的測定，但是會使測定值系統性的偏高。因此有必要對樣品的測定結果進行校正。小麥粉的成分是隨產地、品種、加工等級、加工方式等不同而有所不同，因此校正值K應是一個統計值。
2.6樣品精密度和準確度的測定
通過逐級稀釋法我們制備了500g中準確加入60mg/kgBP的特一粉，放置至少1周之后進行了樣品精密度和準確度的測定，測定結果見表3。
由表3可知，樣品測定的變異系數為3.4%(n=6)，加標回收率在89.3-97.7%之間，說明樣品測定的精密度和準確度均能滿足分析的要求。
2.7紫外分光光度計法與氣相色譜測定樣品結果比較
我們對市場上抽查的19個面粉樣品采用紫外分光光度計法與氣相色譜法分別進行了測定后，采用t檢驗法，說明兩種方法之間不存在顯著差異。
3結論
紫外分光光度法具有儀器價格低、乙醚用量少、測定時間短等優點。其最低檢出濃度、樣品測定的精密度和準確度等均能滿足實際分析的要求，且與氣相色普法的測定結果相比較沒有顯著的差異。因此該方法適宜廣泛地推廣使用。
參考http://www.yusnoinstru.com/，http://www.yunuo-yiqi.com/