高效液相色譜儀流動相選擇要求？
1.流動相的性質要求
液相色譜理想的流動相溶劑應具有粘度低、與檢測器相容性好、易于獲得純產品、毒性低等特點。
選擇流動相時應考慮以下方面:
流速不會改變填料的任何性質 離子交換樹脂的低交聯度和排斥色譜填料有時會使有機相發生一定的膨脹或收縮，從而改變填料床的性能。 堿性流動相不能用于硅膠柱系統 酸性流動相不能用作吸附劑如氧化鋁和氧化鎂的柱系統..
純度液相色譜儀色譜柱的壽命與大量流動相的通過有關，尤其是當溶劑中的雜質積聚在色譜柱上時。
探測器必須與探測器匹配 當使用紫外檢測器時，所用的移動相不應被檢測波長吸收，或者吸收很小。 當使用差示折射檢測器時，應選擇折射率不同于樣品的溶劑作為流動相，以提高靈敏度。
應降低初始粘度（ 高粘度溶劑會影響溶質擴散和傳質，降低塔效率，增加塔壓降，延長分離時間。 優選選擇沸點低于100度的流動相。 C.
_樣品溶解度應合適 如果溶解度不好，樣品將在色譜柱中沉淀，這不僅影響純化和分離，還會使色譜柱劣化。
_樣品易于回收 應選擇揮發性溶劑
2、流動相
當弱酸（3≤pKa≤7）或弱堿（7≤pKa≤8）樣品用反相色譜分離時，通過調節流動相的酸堿度抑制樣品組分的分離，增加組分在固定相的保留，改善峰形，這就是所謂的反相離子抑制技術。 對于弱酸，流動相的酸堿度越小，組分的鉀值就越大 當酸堿度遠低于弱酸的pka值時，弱酸主要以分子形式存在，而弱堿則相反。 在弱酸樣品的分析中，向流動相中加入少量弱酸，通常為50 m mol/L磷酸鹽緩沖液和1％乙酸溶液。在弱堿樣品的分析中，通常向流動相中加入少量弱堿、50 m mol/L磷酸鹽緩沖液和30 m mol/L三乙胺溶液
注:流動相中有機胺的加入可以減少堿性溶質與殘留硅烷醇基之間的強相互作用，減少或消除峰尾現象,在這種情況下，有機胺（例如三乙胺）也被稱為拖尾劑或拖尾劑
流動相選擇方法
1:由強到弱:一般采用90％乙腈（或甲醇）/水（或緩沖液）進行測試，以快速獲得分離結果，然后根據峰條件調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例
2: 3x定律:有機溶劑（甲醇或乙腈）量每減少10％，保留系數增加約3倍，約為定律的3倍。 這是一種聰明省力的方法。 在調整過程中，注意各峰的分離。
3:粗調和精調:當分離達到一定程度時，將10％有機溶劑的變化調整到5％ 根據這一規則，調整率應逐漸降低，直到每個部件的分離不再改變。