一、原理
水樣過濾后，用陽離子交換柱高效液相色譜法進行分析在65°C下，產物用次氯酸鈣氧化，產物氨基乙酸(甘氨酸)在38℃與含2-四氟乙醇的鄰苯二甲醛反應生成熒光物質熒光檢測激發波長340nm，發射波長>455nm。
二、試劑和材料
高效液相色譜儀流動相
試劑水，高純水
將0.005 MKHPO4(0.68gm)溶于960 ml試劑水中加入40 ml高效液相色譜儀級甲醇，用濃磷酸調pH至1.9混合后用0.22μm濾膜過濾Degas。
柱后衍生溶液
次氯酸鈣溶液、1.36g KHPO 4、11.6g NaCl和0.4g NaOH溶于500 ml去離子水中。在50ml去離子水中加入15mg Ca（ClO）2溶液用去離子水稀釋該溶液至1000ml。用0.22μm膜過濾備用。建議每天新鮮制備溶液。
鄰苯二甲醛（OPA）反應液
將10毫升2-巰基乙醇和10毫升乙腈按1:1的比例混合密封儲存在通風櫥中。
硼酸鈉（0.025mol/L）19.1g硼酸鈉（Na 2B 4O 7.10H 2O）溶于1.0L試劑水中如果前一天制備，硼酸鈉完全溶解在室溫下。
對于OPA反應液，將100±10mg OPA（熔點55-58℃）溶于10ml甲醇中。加入1.0l0.025mol/L硼酸鈉溶液混勻，用0.45μ膜過濾，脫氣加入10或L2-硫醇乙醇溶液，混勻該溶液應每日新鮮制備，除非能保持在無氧狀態當溶液在低溫(4℃)下儲存兩周后，熒光背景噪音沒有明顯的增加，在氮氣保護條件下可長時間保存。也可提供商用熒光醛。
樣品保護試劑：硫酸鈉,微粒和分析。
標準儲備液，1.00μg/ml，準確稱取0.1000g純草甘膦溶于1000ml去離子水中。
三、儀器和設備
熒光檢測器和2 0 0μ1定量環高效液相色譜。
色譜柱，250×4mm，鉀離子交換柱，pH=1.9，65℃包裝。
保護柱、C18填料或類似于柱填料的保護柱。
柱溫箱。
柱后反應裝置，包括兩臺柱后衍生泵,一個三通和兩條1.0ml特氟隆延遲管線溫度控制在38攝氏度。
四、分析步驟
純化樣品，用水溶液直接進樣高效液相色譜儀，樣品純化步驟只涉及過濾。過濾法處理自來水、地下水和城市污水未發現明顯干擾。如果在特殊情況下需要其他純化步驟，則需要滿足該方法中規定的回收率。
分析條件
高效液相色譜儀分析
色譜柱：250×4mm，陽離子交換柱，柱溫65℃；
流動相：0.005 M KHPO 4-水-甲醇(24：1)pH=1.9；
流速：0.5ml/min；
進樣體積：200μl；
檢測：激發波長340nm,發射波長455nm。
柱后衍生條件
次氯酸鈣溶液流速：0.5ml/min；
OPA 溶液流速：0.5ml/min；
反應溫度：38℃。
五、結果計算
μg≤L樣品中草甘膦濃度的計算
