1、說明
在西方國家，不孕夫婦的比例占總人群的10-15%（Haas et al，1980）。目前人們還不能精確的知道由免疫學因素導致不孕的發病率是多少。由于有很多不同的檢測方法，人們對抗精子抗體在不孕中的作用存在著很大爭議。在檢測抗精子抗體的傳統檢測方法中，精子凝集檢測和精子固定檢測已被廣泛應用。這些方法及其它凝集檢測都很耗費時間，并且結果與其操作不協調。與傳統的檢測方法相比，用ELISA檢測抗精子抗體具有很多優點。IBL公司的抗精子抗體ELISA試劑盒結合這些優點，并同時還具有高靈敏度和高特異性的特點。此試劑盒操作簡單，并且可以檢測很多種血清。
注意：此實驗的附加信息可從IBL網址（http://www.IBL-Hamburg.com）上獲取，或直接向漢堡IBL公司索取。
2、實驗原理
IBL公司的精子抗體酶免試劑盒提供了人血清和精液中抗精子表面抗原抗體定量檢測所需要的實驗材料。
此檢測試劑盒利用的是非競爭性的原理。包被在包被板微孔中的精子表面抗原是從池子中提取到的，它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那種方法。將疑似免疫學不孕病人的血清（已稀釋好）加入到包被孔中溫育，之后洗板，再加入過氧酶標記的抗人免疫球蛋白（IgA，IgG和IgM）并溫育。溫育后洗板，再加入TMB底物液，并酶標儀檢測所顯示的顏色強度。微孔中所顯示的顏色強度與結合的免疫球蛋白濃度成正比。實驗結果可從標準曲線上讀取，結果單位為units/ml。
3、注意事項和預防措施：
1) 試劑僅供體外診斷和專業人士使用。
2) 試劑盒所中有害物質的信息請見材料安全數據單。
3) 試劑盒中的所有試劑包括檢測過的人血清/血漿對HIV/II，HbsAg和HCV都表現為陰性，但是試劑中會出現此類病毒（HIV/II，HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原體的可能性都不能完全被排除。因此，所有的試劑在使用和處理的過程中都應當作潛在生物有害物質進行處理。
4) 請不要用嘴吹試劑，不要將試劑和樣品接觸皮膚和黏膜。
5) 樣本和試劑盒試劑處理場所，請勿吸煙、飲食和使用化妝品。
6) 處理樣品和試劑時請戴橡膠手套，微生物污染的試劑和樣品會導致錯誤的實驗結果。
7) 按照相應的國家生物安全管理條理公認的方法處理樣品和試劑。
8) 請勿使用過期試劑
9) 按照說明書中所規定的體積（加樣體積和預處理步驟）進行實驗操作。使用校準的移液器時才可以得到理想的實驗結果。
10) 按照國家生物安全管理條理，實驗中的化學物質和所使用或準備的試劑應當當作有害廢物處理。
11) 產品的材料安全數據能夠從IBL公司主頁上載可直接咨詢IBL公司獲取。安全數據單符合下列標準：EU-Guideline 91/155 EWG， ANSI-Standard，ISO-Sstandard 11014，OSHA（US）。
4、試劑盒組成
4.1試劑盒成分
試劑瓶上標出的量都是理論體積，所有的試劑瓶都裝滿了試劑。成分低于250μl的溶液，請注意：所有的溶液都在試劑瓶的底部。
4.1.1包被板，12×8孔，微孔中包被了精子表面抗原。
4.1.2標準品，3支，凍干粉，將每支凍干粉溶解于1ml的洗滌液中。重新配制好的標準品（標準品S5）100μl內含500mU抗精子抗體。
4.1.3酶聯物，601倍濃縮，1支，100μl，內含過氧酶標記的抗人IgG、IgA、IgM，使用前用稀釋液按1：601的比例進行稀釋。
4.1.4 TMB底物液，1瓶，10ml，即用，內含TMB及穩定劑。
4.1.5 TMB終止液，1瓶，10ml，即用，內含1M的H2SO4，注意：避免皮膚接觸。
4.1.6洗滌液，20倍濃縮，1瓶，50ml，用雙蒸水按1：20的比例稀釋，配置好的洗滌液在2-8℃的環境下可穩定存放4周。
4.1.7稀釋液，3瓶，凍干，每瓶用20ml洗滌液稀釋，配置好的稀釋液在2-8℃的環境下可穩定存放2天，如果凍存于-20℃的環境下則可存放更長時間。
4.1.8質控血清，3支，凍干，每支用1ml的洗滌液稀釋。質控血清應在每次實驗時臨時配置，并且僅能使用一次。質控血清的可接受范圍請見質量質控單。
4.1.9封板紙，5片
4.10實驗所需器材但試劑盒不提供
1）校準的精密移液器及取樣吸頭：0-20μl，10-100μl，100-1000μl
2）多道移液器，50-200μl
3）洗板機及洗滌瓶
4）37℃溫育器
5）帶450nm濾光片的酶標儀
4.2試劑盒的儲存與穩定性
試劑盒應當2-8℃的環境下運輸。包被板條一但被拆開，應當將其重新密封好。拆開了板條儲存于2-8℃的環境下時，其免疫活性可穩定6周。
4.3試劑的準備
實驗開始前將所需數目的板條和所有試劑都平衡到室溫。試劑盒可分3次進行檢測，下面所述體積可用來檢測4條包被板條（32個檢測孔）。如果實驗中需使用更多板條，則體積應當相應的進行改變。
4.3.1洗滌液，在30ml濃縮的洗滌液中加入600ml雙蒸水。
4.3.2稀釋液，在每支凍干的稀釋液中加入20ml即用型的洗滌液。
4.3.3標準品、質控血清
a）S5（500mU/100μl），將每支標準品用1ml即用型的洗滌液進行稀釋。重新配制好的標準品（標準品S5）100μl內含500mU抗精子抗體。
b）其它濃度的樣品可用稀釋液進行連續稀釋獲得，具體如下：
S5 500mU/100μl
S4 250mU/100μl= 500μl S5 + 500μl稀釋液
S3 125mU/100μl= 500μl S4 + 500μl稀釋液
S3 62.5mU/100μl= 500μl S3 + 500μl稀釋液
S2 31.3mU/100μl= 500μl S2 + 500μl稀釋液
S0 0 mU/100μl= 500μl稀釋液（零標準品）