二氨基聯苯胺／金屬鹽
DAB是辣根過氧化物酶最比較敏感、常見的底物。它造成明顯的深棕色物質，在水和醇中不融解。大部分狀況下，強烈推薦在DAB中添加不一樣的金屬正離子。當添加金屬鹽如鈷、鎳至底物液中，辣根過氧化物酶能夠更為比較敏感。該類反映物質呈暗灰藍色至灰黑色，且在水及醇中平穩。DAB／金屬鹽染色劑運用的機構染色劑范疇范圍廣。
1. 必須的溶液和獨特機器設備
DAB，0.05 mol／LTris緩沖液(pH7.6), 0.3％ (W/V) 氯化鎳/水存儲液, 30％雙氧水, DPX, 光學顯微鏡(一般含有數碼相機便于于紀錄結果).
2. 操作流程
(1) 用 9 mL 0.05 mol/L Tris緩沖液(pH7.6)融解6 mg DAB；
(2) 加 l mL 0.3％(W/V)氯化鎳/水存儲液(還可以用相等的氯化鈷取代)；
(3) 加0.1 mL 3％雙氧水。雙氧水通常以30％的溶液出示，存儲在4 ℃，此標準能夠不斷1六個月；
(4) 假如出現沉定，用過濾紙過慮；
(5) 加此溶液至標本采集，并孵育1~20 min手洗停止反映；
(6) 提升：假如必須可復染；
(7) 用DPX封片。
氯萘酚
氯萘酚能夠產生這種藍黑色物質。敏感度小于DAB，且物質可溶解醇中。它適用當DAB反映產生較高背景圖或規定更改物質的色調。
1. 必須的水溶液和獨特機器設備
0.03％氯萘酚，用無水乙醇融解(存儲在-20℃)，0.05 mol／LTris(pH7.6)，雙氧水，Gelvatol或是Mowiol，光學顯微鏡(一般含有數碼相機便于于紀錄結果)。
2. 操作流程
(1) 氯萘酚存儲液的提前準備：用10 mL無水乙醇融解0.3 g氯萘酚，存儲于-20℃；
(2) 加100 μL 氯萘酚存儲液至10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6)；
(3) 加0.1 mL 3％雙氧水于水里。雙氧水通常要以30％的水溶液出示，4℃可儲放1六個月；
(4) 乳白色沉定能用過濾紙過慮除去；
(5) 加此水溶液到標本采集中，并在室內溫度孵育10～40 min，手洗停止反映；
(6) 提升：假如必須，開展復染，但只可應用水溶染劑；
(7) 用Gelvatol或是Mowiol封片。
氨乙基咔唑
氨乙基咔唑(AEC)造成鮮紅色物質，其敏感度小于DAB，但可用以DAB反映造成較高背景圖或規定更改物質色調的試驗。此物質可溶解醇，但不溶解水。
1. 必須的水溶液和獨特機器設備
0.4％ AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)融解， 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2)，雙氧水， Gelvatol或Mowiol，光學顯微鏡(一般含有數碼相機便于于紀錄結果)。
2. 操作流程
(1) 用 l mL DMF融解 4 mg AEC。AEC在DMF中平穩，因而，能夠用100 mL DMF融解0.4 g AEC做為存儲液預留；
(2) 加 l mL AEC水溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH5.2)中，并拌和；
(3) 加0.15 mL 3％雙氧水于水里。雙氧水通常是30％的水溶液出示，在4℃可儲放1六個月；
(4) 用過濾紙過慮；
(5) 加此水溶液到標本采集中，并且于室內溫度孵育10～40 min，手洗停止反映；
(6) 提升：假如必須復染，只能用水溶染劑；
(7) 用Gelvatol或Mowiol封片。
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