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    發布時間:2019-08-13 09:56 原文鏈接: McAb的制備方法

    1、體外培養  在細胞培養過程中雜交瘤細胞能產生和分泌McAb,但是一般產生的抗體量很少,約10~100μg/ml。

    近年來發展了各種新型培養技術和裝置,包括用無血清培養液作懸浮培養法,中空纖維培養系統,全自動氣升式或深層培養罐以及微囊或粒珠培養系統等。為了大批量生產McAb,有的公司已建成體內外結合的牛淋巴液循環法,大大提高了抗體的生產量。

    2、體內誘生法 在小鼠體內接種雜交瘤細胞,制備腹水或血清McAb。

    (1)腹水型McAb的制備:選擇適當的健康小鼠,先于小鼠腹腔注射0.3ml―0.5ml降植烷或石臘油,7~10d后于每只小鼠腹腔注射陽性克隆的雜交瘤細胞1~5×106 個。待小鼠腹部明顯膨大到一定程度時,用9號針頭抽取腹水或用16號針頭放腹水,可反復收集數次。

    腹水經3000rpm/min離心后,取上清分裝,置-20℃保存備用。腹水出現快慢與注射細胞類型及小鼠的質量有關。注射細胞少,腹水出現慢,但抗體效價高;注射細胞過多,腹水出現快,但可出現血性腹水。

    (2)血清型McAb的制備:可將對數生長期的雜交瘤細胞于小鼠背部皮下多點注射,待腫瘤達到一定大小后(10~20d)即可采血,血清中McAb的含量可達1~10mg/ml。


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