SPA各種免疫檢測試劑制備實驗——熒光A蛋白純品

熒光 A 蛋白純品是在弱堿性條件下，由熒光素通過蛋白上的氨基共價包繞于 A 蛋白純品制成。其制備如下。

A 蛋白純品

氧化鈉（含NaCl）平衡鹽溶液氫氧化鈉（含 NaCl）FITC

Sephadex G-25 柱棕色瓶

1. 取一定量的 A 蛋白純品，用內含 0.05 mol/L NaCl 的 0.1 mol/L 氧化鈉溶液調節 pH 值到 9.0。

2. 于 23℃ 暗處條件下，按 1 mol 的 A 蛋白中加入 2.8 mol 的 FITC，攪拌 60 min，隨時用含 0～15 mol/L 氯化鈉的 0.1 mol/L 氫氧化鈉使 pH 值維持在 9.0～9.5 之間。

3. 然后將標記 SPA 用平衡鹽溶液于 4℃ 透析數次，過 Sephadex G-25 柱，除去未標記的 FITC，并調節濃度到 1 mg/ml，裝入棕色瓶，并保存于 -20℃ 冰箱中。