哺乳動物中制備基因組DNA實驗——制備DNA
在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續的實驗打下基礎。一般真核細胞基因組DNA有107-9bp，可以從新鮮組織、培養細胞或低溫保存的組織細胞中提取，常是采用在EDTA以及SDS等試劑存在下用蛋白酶K消化細胞，隨后用酚抽提而實現的。實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS乙酸銨乙醇酚氯仿異戊醇TE儀器、耗材離心機搖床研缽實驗步驟1. 切下組織并立即剪成小塊，置于液氮中凍結。 2. 將200 mg~1 g 的組織用預冷的研缽和研杵研碎，或用錘子將其搗為細粉末，每100 mg 組織用1. 2 ml 消化緩沖液懸浮。 3. 500 g 離心細胞5 min，棄上請。貼壁生長細胞先用胰酶消化。4. 細胞用1~10 ml 冰冷的PBS重懸，500 g 離心5 min，棄上清，重復1次。5. 用1體積 的消化緩沖液重懸細胞。......閱讀全文
質粒DNA的大量制備實驗
實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制備也簡單易行，但得到的DNA比較粗制。高純度的質粒DNA可通過氯化銫/溴化乙錠平衡離心法或層析法進一步純化粗制DNA得到。實驗材料 培養基菌株試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇乙酸鉀異丙醇儀器、耗材 離心管實驗
人外周血白細胞DNA制備
實驗概要本實驗從人外周血中制備了白細胞DNA，介紹了制備基本原理及操作步驟。實驗原理從全血制備白細胞DNA，可用非離子去污劑Triton ? X-100直接破裂血中紅細胞和白細胞的細胞膜，釋出血紅蛋白及細胞核，在反應體系中含一定濃度蔗糖，維護核膜內外的滲透壓，以防止核膜破裂，通過離心等手段即可獲得白
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 培養基試劑、試劑盒 EDTASDS乙醇VTE儀器、耗材 平板實驗步驟 1. ?接種一個單菌落于5 ml無菌LB培養液中，在37°C培養至飽和狀態（過夜）。2. ?取1.5 ml培養液以最大轉速離心20 S。棄上清。3. ?沉淀用10
鮭精擔體DNA制備實驗
實驗材料 鮭精DNA試劑、試劑盒 TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材 離心機搖床超聲儀實驗步驟 1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后，用攪拌棒于4℃攪拌過夜，最終獲得一種均勻粘稠液體。?2. ?將一個較大的超聲波探頭插入燒杯
質粒DNA的小量制備實驗
堿裂解小量制備法 煮沸法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
動物組織中DNA的制備
（一）原 理DNA是所有生物體的基本組成物質。真核生物DNA主要存在于細胞核中。制備DNA時應將細胞核膜打破方能釋放出來。細胞中的DNA和RNA分別與蛋白質相結合，形成脫氧核糖核蛋白及核糖核蛋白。在細胞破碎后，這兩種核蛋白將混雜在一起。因此，要制備DNA首先要將這兩種核蛋白分開。已知這兩種核蛋白在不
質粒DNA的大量制備實驗
堿裂解法 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法 層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠，而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制
質粒DNA的小量制備實驗
實驗方法原理 當菌體在NaOH和 SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。堿裂解法是最常用的小量制備質粒DNA的方法。實驗材料 細菌克隆試劑、試劑盒 LB培養基抗生素葡
FFPE樣本核酸（DNA/RNA）制備
福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）組織切片的存檔代表了珍貴且來源廣泛的生物醫學研究材料。隨著越來越多的研究人員轉向 FFPE 樣品的分子分析，開發特定的操作步驟，考慮這些樣品的獨特性質就變得越來越重要。QIAGEN 在 FFPE 樣本純化及下游檢測整個流程中都提供完善的解決方案。QIAamp
鮭精擔體DNA制備實驗
利用這一方案可獲得剪切好的高質量鮭精擔體DNA，它可用于轉化實驗和其他需要高質量擔體DNA的實驗中。實驗材料鮭精DNA試劑、試劑盒TE酚氯仿乙酸鈉儀器、耗材離心機搖床超聲儀實驗步驟1. ?將TE緩沖液加入裝有干燥鮭精DNA的燒杯中，至鮭精DNA濃度為5~10 mg/ml。用10 ml 吸管反復吹打后
鮭精擔體DNA制備實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 鮭精DNA 試劑、試劑盒
斑馬魚胚胎DNA的制備
材料和試劑1.????????蛋白酶K（羅氏03115836001）2.??????? 1M的Tris，pH值8.33.??????? 氯化鉀4.??????? 吐溫20（10％，EMD4 biosciences，655207）5.??????? NP40（10％，Merck，492018）設備1.
制備DNA測序模板實驗
制備單鏈M13噬菌體DNA 小量裂解物中制備λ噬菌體DNA 雙脫氧測序的雙鏈質粒DNA的堿變性 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌
小量制備質粒DNA(強堿法)
實驗概要本文介紹了強堿法小量制備質粒DNA的原理及操作流程。有助于了解基因工程操作中運載基因的載體，掌握最常用的提取質粒DNA的方法。實驗原理堿變性抽提質粒DNA是基于染色體DNA的變性與復性的差異而達到分離的目的。利用溶菌酶、強堿(NaOH)及表面活性劑(SDS)使細胞破壁、膜，釋放出胞內染色體D
DNA熒光染色的樣品制備
試劑、試劑盒 PBS儀器、耗材 DNA熒光染料 流式細胞儀實驗步驟 DNA是細胞內含量比較恒定的參量，隨著細胞增殖周期的各時相而發生變化。熒光染料（如PI）可選擇性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的雙螺旋堿基之間，與細胞特異性結合，DNA含量與熒光染料的結合量成正比，因此通過測定熒光強度可獲知細胞的
細菌中制備基因組DNA實驗——小量制備
真核生物的一切有核細胞（包括培養細胞）都能用來制備基因組 DNA。真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細胞核內，因此，制備DNA的原則是既要將DNA與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持DNA分子的完整。實驗方法原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS（十二烷基硫酸鈉）和蛋白酶K的溶液
SDS堿裂解法制備質粒DNA——大量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從大規模（500 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液(1) 堿
SDS堿裂解法制備質粒DNA——小量制備
用堿和 SDS 處理可以從細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒則可以用電泳或限制性核酸內切酶消化的方法鑒定；經聚乙二醇處理進一步純化后，其可以用做 DNA 測序反應的模板。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從小量 ( 1~2 ml）細菌培養物中
質粒DNA的小量制備實驗——煮沸小量制備法
實驗方法原理當菌體在NaOH和?SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。推薦采用本方案從1-24個菌落培養液中制備少量的質粒DNA，盡管該方案十分快捷，但制備的DNA的
SDS堿裂解法制備質粒DNA——中量制備
實驗方法原理用堿和 SDS 處理可以從中度規模（20~50 ml）的細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的 DNA 產物可用于電泳分析或限制性內切核酸酶消化，經柱層析進一步純化之后，還可用于轉染哺乳動物細胞。試劑、試劑盒堿裂解液抗生素乙酵酚氯仿STETE儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法小量制備質粒DNA
這個方法 [ 根據 Holmes 和 Quigley 的方法（1981) 修訂而成 ] 是將細菌懸浮于含有 Triton X-100 和能消化細胞壁的溶菌酶的緩沖液中，然后加熱到 100℃ 使其裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法大量制備質粒DNA
實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處理可從大量（500 ml ) 細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心可進一步純化。試劑、試劑盒抗生素乙醇異丙醇乙酸鈉STETTE溶菌酶儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液沸水浴實驗步驟一
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化 實驗步驟
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
實驗方法原理 用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗步驟 材料：緩沖液和溶液：堿裂解液 I：50 mmol/L 葡萄糖25 mmol/L Tris-HCl（pH8.0）10 mmol/L EDTA（
質粒DNA的小量制備實驗——堿裂解小量制備法
實驗采用國產的質粒小量抽提試劑盒。它是一種新型的離子交換柱，在特定的條件下，使質粒能在離心過柱的瞬間，結合到質粒純化柱上，在一定條件下又能將質粒充分洗脫，從而實現質粒的快速純化。實驗材料DNA試劑、試劑盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇儀器、耗材離心機漩渦混合器分光光度計實驗步驟1
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗方法原理用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗步驟材料：緩
酵母菌DNA制備實驗1
實驗材料酵母試劑、試劑盒YPD破菌緩沖液酚氯仿異戊醇LB儀器、耗材玻璃珠試管搖床培養箱離心機實驗步驟1. ?注盛于一個13 mm×100 mm 無菌玻璃試管中的2 ml 培養基接種含有帶目的基因的質粒的酵母單菌落，在轉動或搖動培養箱中30℃過夜培養到靜止期。?2. ?將1.5 ml 的過夜培養物轉移
用于－PCR－的模板－DNA－制備實驗
實驗方法原理 實驗步驟 1. 10 mm 厚石蠟切片 10～15 張，置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脫蠟 二甲苯 1200 μl，9000 r/min，8 min×3。3. 脫水無水乙醇 1200 μl，9000 r/min，5 min×3。4. 打開 Eppendor
DNA疫苗的制備方法和特點
DNA疫苗?又稱基因疫苗或核酸疫苗，將能編碼引起保護性免疫應答的病原體免疫原基因片段和質粒重組，重組體直接注入宿主機體，使體內持續表達該抗原，進而誘導出保護性體液免疫和細胞免疫的新型疫苗.這種核酸既是載體，又能在真核細胞中表達抗原，刺激機體產生特異而有效的免疫反應。優點：免疫效果好，可激發機體全面免
小鼠肝基因組DNA制備
原理DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中，制備 DNA 的原則是既要將 DNA 與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及鏈霉蛋白酶 E 的應用使這兩個原則得到了保證。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。