實用哺乳動物細胞培養手冊（六）
緩沖系統大多數細胞所需 pH 在 7.2 - 7.4。但是，細胞培養最適 pH 值隨培養的細胞種類不同而 不同。成纖維細胞喜歡較高 pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸 pH (7.0 - 7.4)。 由于多數培養液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與 CO2 體系進行緩沖，因此，氣相中的 CO2 濃度 應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中 CO2 濃度設定在 5％，培養液中 NaHCO3 的加入量為 1.97g/L；如果 CO2 濃度維持在 10％，培養液中 NaHCO3 的加入量為 3.95g/L。細胞培養瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液，在 pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力，但是非 常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L） 共用，以抵消因額外加入 HEPES 引起的滲......閱讀全文
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術，其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中，特別是用于生產疫苗，蛋白質，酶，抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域，特別是在制藥**域，其中將細胞用作研究許多疾病（例如癌癥或心臟病）的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證，基于細胞的測定法
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶：用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體，常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
細胞培養細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
骨骼肌細胞培養和肌細胞培養
骨骼肌細胞培養 1．殺死動物，無菌取大腿肌組織，切成0.3～0.5厘米小塊。 2．用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，無菌紗網或紗布濾過，合成培養基加10％小牛血清培養，為促進分化可加1％的胎汁。 3．細胞接種量為2×106/皿，接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織，所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法，用單一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的，它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
細胞培養細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試，具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌
哺乳動物“計算時間”機制被發現
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哺乳動物精核的制備實驗
實驗材料哺乳動物組織培養細胞（如 HeLa 細胞）試劑、試劑盒PBS裂解緩沖液緩沖液 B儀器、耗材帶有 B 型研磨棒的杜恩斯勻漿器光學顯微鏡實驗步驟1. 培養并收獲 3L 1×106?細胞/ml 的哺乳動物組織培養的細胞（如 HeLa）， 用 1L PBS清洗兩次。2. 用 20 倍于沉淀體積（40
早期哺乳動物牙、耳如何演化？
中新網北京4月4日電 (記者 孫自法)在從爬行動物到哺乳動物的進化過程中，有兩個最為重要的形態和功能變化，表現在牙齒從簡單到復雜以增加食物的攝取能力、下頜頭骨關節變為中耳聽骨組合以提高聽覺效力，二者如何演化備受學界關注。中國科學院古脊椎動物與古人類研究所(古脊椎所)發布消息說，該所毛方園研究員、張馳
哺乳動物細胞的生物特征
哺乳動物是全身被毛,運動快速,恒溫,胎生和哺乳的脊椎動物.它是脊椎動物中軀體結構,功能和行為最復雜的一個高等動物類群.鳥類和哺乳類都是從爬行動物起源的,它們分別以不同的方式適應陸棲生活所遇到的許多基本矛盾(陸地上快速運動,防止體內水分蒸發,完善的神經系統和繁殖方式),并在新陳代謝水平全面提高的基
Nature子刊：首個哺乳動物“手機”
來自蘇黎世聯邦理工學院的研究人員確實地構建出了一種“手機”：他們以這種方式對哺乳動物細胞進行了重編程，使得細胞能夠通過化學信號給彼此“打電話”。 打電話是一個相互交流信息的過程：A給B打電話，兩者就B應該做的事情達成一致意見。一旦這樣做了，B方就會給A方去電話讓他或她知道。A不再回復B電話
哺乳動物RNAi技術－Mammalian－RNA－Interference
Mammalian RNA InterferenceThomas TuschlLaboratory for RNA Molecular BiologyThe Rockefeller University, New York?Excerpted from?RNAi: A Guide To Gene S
哺乳動物精核的制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 哺乳動物組織培養細胞（如 HeLa 細胞）試劑、試劑盒 PBS裂解緩沖液緩沖液 B儀器、耗材 帶有 B 型研磨棒的杜恩斯勻漿器光學顯微鏡實驗步驟 1. 培養并收獲 3L 1×106 細胞/ml 的哺乳動物組織培養的細胞（如 HeLa）， 用 1L PBS清洗兩次。2. 用 2
揭秘早期哺乳動物的發育過程
由于小鼠的易實驗性和強遺傳性，其一直是生物醫學研究中使用廣泛的動物模型。但是，胚胎學研究發現，小鼠早期發育的許多方面與其他哺乳動物不同，從而使有關人類發育的推論復雜化。英國劍橋大學等研究團隊合作構建了兔發育的形態學和分子圖譜。該研究成果于近日發表在《Nature Cell Biology》，題為
基因代謝速度決定哺乳動物進化
通常認為人類和黑猩猩之間僅有1%～2%的基因差異，但事實上，區分人類和黑猩猩的基因比科學家預料的要多。一項新的研究表明，把人類和近親——黑猩猩區分開的是人類獲得新基因、拋棄舊基因的速率。 ? 人類比黑猩猩和其他哺乳動物基因代謝速度快。（圖片提供：《科學》雜志網站） ?人類和黑猩猩這兩個物種
揭秘：哺乳動物大腦的空間編碼
大腦經常被比作一臺電腦，它的硬件由組裝在復雜回路中的神經元組成；它的軟件是管理神經元行為的大量編碼。但有時，即使大腦的硬件似乎不足以完成任務，它也會表現得異常出色。例如，盡管大腦的空間感知回路似乎適合代表更小的區域，但是人類和其他哺乳動物如何設法在大規模環境中導航的，這一直是個謎。 在一項新的
哺乳動物“計算時間”機制被發現
候鳥遷徙，蝴蝶振翅，心臟律動，生命的節律演繹著自然界最美妙的生命交響樂。然而，生物體如何能感知一天的時刻變化？相關問題一直懸而未決，等待著科學家們的實驗與回答。北京大學國家生物醫學成像科學中心主任程和平團隊通過對哺乳動物的生物鐘主鐘——視交叉上核（SCN）的時間計算機制研究發現，哺乳動物大腦深部
氣候突變或影響哺乳動物數量
古埃及文物幫助科學家了解隨著時間的推移哺乳動物的數量是如何發生變化的。 古埃及法老陵墓上的銘文和雕刻通常會有羚羊圖案。一項新研究顯示，在古埃及，當發生顯著的氣候變化時，諸如大羚羊此類的哺乳動物的數量也會發生波動。 這項發現基于十多年前動物學家Dale Osborn開展的針對古埃及哺乳
化石揭示早期哺乳動物皮毛外觀
許多恐龍和翼龍都有艷麗的羽毛，但早期哺乳動物的皮毛顏色卻很單調。對6具生活在侏羅紀和白堊紀時期的哺乳動物毛皮化石的研究表明，它們都長著灰褐色的毛發。 “它們是恐龍的食物，不想引人注目。”比利時根特大學的Matthew Shawkey表示，這種保護色有助于躲避恐龍的捕食。 過去，人們認為復原遠
哺乳動物的細胞核移植
實驗概要本實驗哺乳動物為實驗材料介紹細胞核移植技術。實驗原理細胞核移植，就是將一個細胞核用顯微注射的方法放進另一個細胞里去。前者為供體，可以是胚胎的干細胞核，也可以是體細胞的核。受體大多是動物的卵子。因卵子的體積較大，操作容易，而且通過發育，可以把特征表現出來，因此細胞核移植技術，主要是用來研究胚胎
哺乳動物起源有了新證據
哺乳動物起源問題是學術界長期爭論的熱點，已經滅絕的“賊獸”是科學家們在研究哺乳動物起源時爭論的焦點之一。有人認為賊獸處于哺乳動物冠群之外，屬于比哺乳動物更原始的哺乳形類動物，而也有人指出，賊獸就屬于早期的哺乳動物。我國科學家的一項最新發現為解開這一謎團提供了證據。 9月11日，《自然》雜志發表
研究發現群居哺乳動物壽命更長
從鼩鼱的兩歲到弓頭鯨的逾200歲，哺乳動物的最大壽命可以相差100倍之多。通過對近1000種哺乳動物進行分析，中國科學院動物研究所的科學家們與合作者發現，群居物種普遍比獨居物種壽命更長，支持了社會組織和壽命的關聯演化。相關研究近日發表于《自然—通訊》。作為高級哺乳動物的人類，當前一人住、一人食、一人
哺乳動物下頜關節起源獲揭示
英國科學家對一個2.25億年前的化石的分析顯示，一種哺乳動物樣下頜關節可能在哺乳動物出現的約1700萬年前就在哺乳動物的親戚中獨立演化。這一發現或代表了化石記錄中這類下頜關節的最早樣本，并揭示了這一重要結構的起源。相關研究近日發表于《自然》。哺乳動物的一個關鍵特征是鉸鏈狀的下頜關節，即下頜齒骨與顱骨
哺乳動物“變”溫血動物之謎揭開
科技日報訊 （記者張夢然）英國《自然》雜志近日發表的一項研究指出，哺乳動物的溫血性可能起源于約2.33億年前的晚三疊世。這項基于哺乳動物祖先內耳化石的研究結果增進了人們對哺乳動物演化史的理解。溫血性（或稱內溫性）是哺乳動物和鳥類的一個關鍵特征，能讓它們保持幾乎恒定的核心體溫，從而生活在各種不同的環境
細胞培養資料
第一章 細胞培養的基本原理與技術現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以
細胞培養FAQ
1 冷凍管應如何解凍？?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？?除少數特別
腫瘤細胞培養
食管癌細胞株表達MMP－2：1.細胞種類：食管癌細胞株；2.培養的天數：2d;細胞倍增時間--24h左右；3.放大倍速：倒置熒光顯微鏡，100倍；4.培養基種類：1640+10%胎牛血清；5.細胞狀態與特征簡述:細胞貼壁生長；6.圖片目的：鑒定食管癌細胞表達MMP-2，胞漿中綠色熒光為MMP-2，細