免疫篩選實驗
實驗材料 cDNA試劑、試劑盒 BHI氯霉素NaOHSSC氯仿異戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸鈉免疫沉淀緩沖液儀器、耗材 轉子硝酸纖維濾膜離心管微量多孔洗滌儀實驗步驟 1. 往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含適當抗生素的選擇性BHI培養液,并分別接種獨立的cDNA克隆,37℃溫育過夜。2. 在250 ml 燒瓶中加入50 ml BHI/抗生素培養液,以10個克隆過夜培養液為一組, 從每個微孔中取100 μl 培養液,混合后接種到燒瓶中。3. 37℃培養至A590=0.7,然后加入氯霉素繼續于37℃溫育過夜;對每組10個過夜的克隆重復培養。4. 2 000 g 4℃離心10 min,制備質粒DNA。 5. 將制得的約50 μg 質粒DNA溶于1.5 ml TE緩沖液中,移入15 ml無菌、帶蓋的玻璃培養管中。6. 沸水浴1......閱讀全文
離心濃縮儀是利用抽真空降低溶劑沸點
離心濃縮儀是利用抽真空降低溶劑沸點,靠真空泵的抽真空和/或輔以冷阱及時收集所蒸發出來的蒸氣來完成去除溶劑、干燥/濃縮樣品的目的。 離心濃縮儀是一種常用的蒸發儀器,本機型適合于分子生物學、生物化學、遺傳學、分析化學、質量控制等實驗室的RNA/DNA,核苷、蛋白、藥物、代謝物、酶或類似樣品的濃縮合成
抗血清中去除交叉反應性抗體實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 封閉緩沖液 封閉液 細胞懸浮緩沖液 抗體 LB 培養基 儀器、耗材
抗血清中去除交叉反應性抗體實驗
試劑、試劑盒 封閉緩沖液封閉液細胞懸浮緩沖液抗體LB 培養基儀器、耗材 Sorval GSA 轉子或相當轉子適用于處理細菌的超聲波破碎儀大腸桿菌 Y1090 hsdR實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存緩沖液和試劑的組分請見時錄 12。將貯存液稀釋到適當的濃度。封閉緩沖液10 mmol/L Tris-Cl
熟悉真空離心濃縮儀的工作原理
?真空離心濃縮儀是分子生物學、生物化學、遺傳學、分析化學、質量控制等領域中RNA/DNA、核苷、蛋白質、藥物、代謝物、酶或類似物的常用蒸發儀器,用于樣品濃縮成分的溶劑去除以及濃縮或者蛋白質的干燥。經離心濃縮處理后的樣品可方便地用于化學、生化、生物分析、免疫篩選和儀器分析等各種定性和定量分析。??真空
解析真空離心濃縮儀和凍干機的區別
樣品濃縮技術是樣品前處理的比較常用技術手段之一,應用廣泛,濃縮的方法也有很多,各有所長,常見的濃縮儀器也有很多,例如:旋轉蒸發儀、氮吹儀、真空離心濃縮儀、冷凍干燥機/凍干機。接下來杰懋萬得福小編就主要為大家介紹真空別離心濃縮儀和凍干機的區別。1、真空離心濃縮儀:原理:采用離心機、真空和加熱相結合的方
來講講平行濃縮儀的濃縮“三要素”
平行濃縮儀采用大屏幕顯示屏,操作程序簡單,整個儀器由合金鋁制成,干燥室的內部經過防腐處理。免維護非接觸式驅動器旋轉系統,設計精美,操作簡單,使用方便。它可以通過存儲功能輕松讀取,并且可以同時保存溫度,轉速,時間和其他條件。使用時,只需選擇常用條件并按開始按鈕即可開始操作。在使用過程中,也可以關閉加
抗血清中去除交叉反應性抗體實驗
本方案介紹一種通過抗血清與細菌裂解液共同溫育而從多克隆抗血清中去除與細菌編碼蛋白質發生反應抗體的方法。本節介紹的吸收方法僅僅適用于制備含有低滴度抗大腸桿菌抗體的抗血清。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒封閉緩沖液封閉液細胞懸浮緩沖
干貨!平行濃縮儀的基本知識點
平行濃縮儀是在溫和的條件下,其基本原理是通過同時加熱/減壓/漩渦振蕩將多樣品快速蒸干或定量濃縮的小型儀器,有效的避免高溫對某些目標物的破壞,全程無需操作人員看管,自動化程度高 平行濃縮儀用于在離心狀態下連續抽取樣品,甚至接近真空,從而可以快速蒸發樣品中的溶劑,可以快速濃縮或干燥樣品系統,平行濃縮儀
平行濃縮儀的離心濃縮要點說明
?平行濃縮儀綜合利用離心力、加熱和外接真空泵提供的真空作用來進行溶劑蒸發,可同時處理多個樣品而不會導致交叉污染。濃縮儀應用于DNA/RNA、核苷、蛋白、藥物、代謝物、酶或類似樣品的濃縮合成物的溶劑去除,具有濃縮效率高,樣品活性留存高的特點。一個完整的濃縮系統由:濃縮儀、濃縮儀轉子、冷阱、真空泵、冷凝
實驗室實驗器材使用實驗
試劑、試劑盒 純水儀器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平溫度什 移液瓶實驗步驟 一、實驗材料:不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、實驗步驟:1. 根據試劑瓶上的標志說明該試劑的等級及保管方法2,玻璃量器的使用:按照玻璃量器上的標
實驗動物實驗標本的采集實驗
(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:適用于少量采血,如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后,將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈,讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。②眼眶后靜脈叢采血:一手拇指及食指抓住鼠兩耳之
實驗室實驗器材使用實驗
1、了解化學試劑的等級和保管原則2、掌握玻璃器械的規范使用3、明確各玻璃器械的功用試劑、試劑盒純水儀器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平溫度什移液瓶實驗步驟一、實驗材料:不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、實驗步驟:1. 根據試劑瓶上的
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物尿液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒水儀器、耗材收集器實驗步驟尿液的采集 常用的采集方法較多,一般在實驗前需給動物灌服一定量的水。(1) 代謝籠法:此法較常用,適用于大、小鼠。將動物放在特制的籠內。一般需收集 5 小時以上的尿液,最后取平均值。(2) 導尿法:常用于雄性兔、狗。動物輕度麻醉后,固定于手術臺上
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腦脊液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 狗、兔腦脊液的采集:通常采取脊髓穿刺法,穿刺部位在兩髂連線中點稍下方第七腰椎間隙。動物麻醉后側臥位固定,頭尾部盡量彎向腰部,去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮膚,腰穿針垂直刺入,當有落空感及動物的后肢跳動時,針已達椎管內,抽去針芯,即
關于新藥研發中-宿主細胞蛋白-那些事
宿主細胞是生產諸如重組蛋白、抗體和疫苗類藥物的上游材料,不同用途的藥物會采用不同的宿主細胞,重組蛋白類藥物常用的細胞有中國倉鼠卵巢細胞(CHO),新型疫苗常采用非洲綠猴腎細胞(Vero)、犬腎細胞 (MDCK)、昆蟲細胞、人二倍體細胞,傳統疫苗還會采用大腸桿菌、雞胚等作為宿主細胞。宿主細胞蛋白如果殘
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腹水的采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟抽取大鼠、小鼠的腹水時,抓取固定動物,使動物腹部朝上,消毒皮膚,針頭在腹股溝和腹中線之間刺人腹腔,腹壓高時腹水自然流出,腹水少時可用注射器抽取。
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
本節介紹一種利用結合細菌蛋白質的基質去除粗制免疫球蛋白中與細菌編碼蛋白質發生反應成分的方法(de Wet et al.1984)。該方法也適用于利用培養的細胞或組織抽提物去除交叉反應抗體。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。試劑、試劑盒緩沖液和
雜交實驗的實驗目的
了解用聚乙二醇PEG方法誘異同種植物原生質體融合的技術,并能根據新本原生質體的形態樗來鑒別雜種細胞。
細胞劃痕實驗實驗步驟
一.準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)二.流程:1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2.在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過一夜能鋪
實驗動物標記實驗
實驗材料 兔子 小鼠試劑、試劑盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟 1. 染色法 適用于小動物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上,以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有:3%~5%苦味酸溶液(黃色)、0.5%中性品紅(紅色)、2%硝酸銀(咖啡色)
實驗動物標記實驗
實驗材料兔子 小鼠試劑、試劑盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟1.?染色法 適用于小動物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上,以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有:3%~5%苦味酸溶液(黃色)、0.5%中性品紅(紅色)、2%硝酸銀(咖啡色)。標記的原則是
雜交實驗的實驗原理
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合,所產生的雜種細胞,即異核體經過培養可再生新壁,分裂形成愈傷組織,進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞,故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組,因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究
實驗動物實驗標本的采集實驗——動物采血方法
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:適用于少量采血,如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后,將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈,讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
試劑、試劑盒 緩沖液和溶液細胞裂解緩沖液NaOHTris-緩沖鹽溶液TBSTriton X-100 溶菌酶胰 DNA 酶 I制備用于文庫篩選的抗體大腸桿菌培養液儀器、耗材 離心和轉子親和層析柱溴化氫活化的 Sepharose 4B實驗步驟 材料緩沖液和溶液貯存液,緩沖液和試劑的組分請見附錄 12將貯
親和層析法去除交叉反應性抗體實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 細胞裂解緩沖液 NaOH Tris-緩沖鹽溶液 TBS Triton X-100 溶菌酶
雜交實驗的實驗方法
所有操作均在超凈工作臺上進行。1.原生質體的分離和收集。2.將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O(pH5.8~6.2)原生質體密度調整為2×105/ml左右(用血細胞計數板統計原生質體密度)。3.將兩種原生質體懸液等量混合。4.用刻度吸管將混合的原生質體懸
克爾效應實驗的實驗原理
各向同性的介質如玻璃,石蠟,水,硝基苯等,在強電場作用下會表現出各向異性的光學性質,表現出雙折射現象。折射率差與電場強度的平方成正比,稱為克爾效應。在兩平行平板之間加上高電壓,在電場作用下,由于分子的規律排列,這些介質就表現出象單軸晶體那樣的光學性質,光軸的方向就與電場的方向對應。當線偏振光沿著與電
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,zui大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。1.劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,均要求實驗操作在三個不同的區域內進行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行:(1)標本
細胞轉染實驗的實驗步驟
細胞傳代(1)試驗準備:200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號筆,培養皿,離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基,用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液,消化1分鐘(37。C,5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁,
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。劃分操作區:目前,普通PCR尚不能做到單人單管,實現完全閉管操作,但無論是否能夠達到單人單管,均要求實驗操作在三個不同的區域內進行,PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行:(1)標本處理區,