RNAi技術
DNA芯片檢測siRNA專一性 長片斷的雙鏈RNA (dsRNA) 導入例如植物，真菌，果蠅，線蟲等生物的細胞中會引發同源mRNA的降解——這就是所謂的RNA interference (RNAi)。RNAi分兩個步驟，首先是長片斷雙鏈dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25個堿基的small interfering RNAs (siRNAs)。這些siRNA隨后和相關蛋白組合成為RNA-induced silencing complex (RISC) ，這個復合物以同源mRNA為靶摧毀mRNA。兩年前Elbashir and Tuschl用siRNA在哺乳動物細胞中成功引發特異基因的沉默，從此siRNA廣泛應用于這個領域。 siRNA介導的基因沉默通常要求高度的序列專一。Tuschl......閱讀全文
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(1)
目前RNAi技術已經進入了生物科學研究的許多領域，成為了一種主要的生物學研究工具，發展得相當迅速，并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞，獲得2006年諾貝爾獎醫學/生理獎。然而這一才歷經十個年頭的技術依然對于許多研究人員來說還是很陌生的，以下是有關 i技術在哺乳動物細胞中應用的具體設計策略，主要
哺乳動物細胞的RNAi技術策略(2)
1.化學合成盡管化學合成是最貴的方法，但是卻是最方便的――研究人員幾乎不需要做什么工作。包括Ambion和Qiagen公司都可以根據用戶要求提供高質量的化學合成si 。主要的缺點包括價格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價格比其他方法高，為一個基因合成3―4對si s 的成本就更高了，
RNAi的實驗原理和操作實用技術(1)
幾十年來生物學上最重要的進展，也許是關于RNA分子能調節基因表達的發現。RNA干涉（RNAi）是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象，是在線蟲中發現的，在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。此后，科學家們明白，RNAi還有其他形式，它既是一種了解基因功能的強大工具，又是很多生物的基因組所
RNAi的實驗原理和操作實用技術(2)
2.體外轉錄以DNA Oligo為模版，通過體外轉錄合成siRNAs，成本相對化學合成法而言比較低，而且能夠比化學合成法更快的得到siRNAs。不足之處是實驗的規模受到限制，雖然一次體外轉錄合成能提供足夠做數百次轉染的siRNAs，但是反應規模和量始終有一定的限制。而且和化學合成相比，還是需要占
RNAi的功能
1.高通量的研究基因功能在后基因組時代，需要大規模高通量的研究基因的功能，由于RNAi能高效特異的阻斷基因的表達，因而RNAi成為研究基因功能的很好的工具。研究者將線蟲三號染色體上2232個基因對應的dsRNA合成出來，并注射到線蟲性腺內，然后觀察子代細胞分裂時出現的異常表型，結果發現了133個基因
RNAi－實驗介紹
1. RNAi 介紹 RNA 干擾（RNAi:RNA interference）是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello（1）在線蟲實驗中發現的，2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導
RNAi的特征
①RNAi是轉錄后水平的基因沉默機制；②RNAi具有很高的特異性，只降解與之序列相應的單個內源基因的mRNA；③RNAi抑制基因表達具有很高的效率，表型可以達到缺失突變體表型的程度，而且相對很少量的dsRNA分子（數量遠遠少于內源mRNA的數量）就能完全抑制相應基因的表達，是以催化放大的方式進行的；
RNAi－實驗介紹
1. RNAi 介紹RNA 干擾（RNAi:RNA interference）是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello（1）在線蟲實驗中發現的，2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導。這個方法與常規方
RNAi相關術語
1.RNAi?：（RNA interference）RNA干擾一些小的雙鏈RNA可以高效、特異的阻斷體內特定基因表達，促使mRNA降解，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型，稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi?，也譯作RNA干預或者干涉）。它也是體內抵御外在感染的一種重要保護機制
利用RNAi技術進行改良小麥面粉白度的研究
??? 【目的】通過RNAi策略抑制小麥籽粒ppo的表達，獲得籽粒PPO 酶活性低、白度高的轉基因小麥新種質。??? 【研究意義】小麥面粉及其面食品的感官品質（尤其色度）是小麥磨粉品質和面食品的主要評價指標（如國標SB/T 10137-93），特別是鮮濕面條、饅頭、餃子、烙餅等中式食品對白度的要求相
Nature里程碑成果：RNAi遺傳篩查新技術
基因發現領域出現了一個可與基因敲除小鼠一比高下的新競爭者。來自洛克菲勒大學的研究人員證實，相比于采用特殊培育遺傳工程小鼠的傳統方法有可能要花費數十年時間，一項利用RNA干擾(RNA interference)的新技術在數月內發現了導致表皮腫瘤生長的基因。研究人員在發表于8月14日《自然》(N
利用RNAi技術進行改良小麥面粉白度的研究
利用RNAi技術進行改良小麥面粉白度的研究 【目的】通過RNAi策略抑制小麥籽粒ppo的表達，獲得籽粒PPO 酶活性低、白度高的轉基因小麥新種質。 【研究意義】小麥面粉及其面食品的感官品質（尤其色度）是小麥磨粉品質和面食品的主要評價指標（如國標SB/T 10137-93），特別是鮮濕面條、饅
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的分子機制
通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱為Dicer的酶
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明，一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型， 稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi）。siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子，能夠
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi原理圖解
The Mechanism of RNA Interference (RNAi)Long double-stranded RNAs (dsRNAs; typically >200 nt) can be used to silence the expression of target genes in
RNAi具有的特征
①RNAi是轉錄后水平的基因沉默機制；②RNAi具有很高的特異性，只降解與之序列相應的單個內源基因的mRNA；③RNAi抑制基因表達具有很高的效率，表型可以達到缺失突變體表型的程度，而且相對很少量的dsRNA分子（數量遠遠少于內源mRNA的數量）就能完全抑制相應基因的表達，是以催化放大的方式進行的；
RNAi原理FLASH演示
How does RNAi work? Genetic and biochemical data indicate a possible two-step mechanism for RNA interference (RNAi): an initiation step and an effecto
RNAi放大效應機制
由于在一些生物中RNAi的影響格外顯著，有人提出在RNAi 途徑中可能存在某個（信號）擴增的步驟。這種擴增可能是復制外源注入的dsRNA從而產生更多的siRNA ，也可能是直接擴增siRNA本身。這種擴增可能在RNA誘導沉默復合物（RISC）形成過程進行，作為RISC形成的補充，或者獨立于R
BLOCKiT－RNAi－Designer
Allows you to design synthetic siRNA, Stealth RNA, or shRNA molecules from nucleotide target sequences, or convert an siRNA molecule sequence into a S
RNAi術語表
RNAi GlossaryDicer?- Dicer is a member of the RNase III family of nucleases that specifically cleave double-stranded RNAs. Dicer processes long dsRNA
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關；② 在果蠅中，參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失，同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現，他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的RNA
中國醫學科學院：RNAi技術解析病毒
腸道病毒71型(EV71))已被證明是引起近年來亞洲-太平洋地區頻發的手足口病重癥并導致患者死亡的最主要病原體。但是, 其是如何感染神經系統并導致嚴重神經系統病理損傷的分子機制尚不明確。 來自中國醫學科學院&北京協和醫學院，昆明醫科大學等處的研究人員通過RNAi技術對 EV71 病
Cell頭條：內源RNAi信號
來自加拿大麥吉爾大學的Mathieu Flamand 和Thomas F. Duchaine在7月20日《細胞》(Cell)雜志上發表了一篇題為“SnapShot: Endogenous RNAi Pathways”的文章。文章以概略圖加上主題內容簡介并推薦了10篇文獻，簡明扼要地概述了
RNAi及基因沉默原理
RNA 干擾(RNAinterference，RNAi)是由雙鏈RNA (double-strandedRNA，dsRNA) 引發的轉錄后基因靜默機制。其原理是：RNaseIII 核酶家族的Dicer，與雙鏈RNA 結合，將其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干擾RNA (small
RNAi片段siRNA設計原則
RNAi target selection rules:Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).S