摻假 蜂蜜的檢測 蜂蜜是一種高品質的天然甜味劑,是由蜜蜂從花蜜或蜜露中生產出來的。植物花蜜主要由葡萄糖和含蔗糖的果糖組成,還含有少量的葡萄糖和果糖的雙糖化合物。這種混合物或者化合物可以用其他來源添加而成以假冒蜂蜜,如高果糖玉米糖漿(四碳糖)。 直到現在,對于用C4糖制作的摻假蜂蜜的檢測是測量蜂蜜的δ 13 C值和與EA法相比得到的它的蛋白質百分比。但是這種方法對摻假品的可靠的檢測限是四碳糖添加物的碳含量為7%,另一種技術是使用HPLC進行糖的圖像識別。然而多同位素分析很難檢測低量的C-4糖摻假品,尤其添加了C-3糖的摻假品。 有了HPLC和同位素比質譜的結合便可填補這個空白,蜂蜜中每一種單糖的δ 13 C值都能分析。果糖和葡萄糖的δ 13 C的比值,其他不常見糖類的檢測,還有各種糖樣本的測定都可以在一個單次HPLC操作中確定。 在不同的兩天時間,分兩批次分析了3號蜂蜜的4份相同樣品,結果證明了irm-LC/MS方法的精密度和可靠度。葡萄糖的平均δ 13 C值為-24.86 ‰ ± 0.05 ‰,果糖的平均值為-24.86 ‰ ± 0.15 ‰,蔗糖隨其他少量化合物洗脫,不用于精密測定。

表1:8個蜂蜜樣品的irm-LC/MS和EA分析結果
表1所示是用irm-LC/MS和EA分析的8個蜂蜜樣品,以給出天然蜂蜜和摻假蜂蜜的不同情況。EA法可檢測出2個摻假蜂蜜產品,irm-LC/MS法檢測出4個摻假的產品。 峰蜜1的Flu/Glu比值正常,但是由于其很小的負δ值,超過了-23.5 ‰,仍懷疑為摻假產品。蜂蜜主要成分和蛋白質的比較表明有16.7%的摻假率。

蜂蜜1
蜂蜜2顯然為100%的四碳糖。由于蛋白質不能沉淀,所以不能用測蛋白質法。用irm-LC/MS法可以檢測在蔗糖之前的四分之一的糖,峰面積的Flu/Glu比為0.65,蔗糖和葡萄糖一樣多,果糖的δ 13 C值比葡萄糖還小2.7‰,這最終證明了此蜂蜜為人工制作。

蜂蜜2
蜂蜜5是摻假產品,但是不能用同位素比的方法檢測出來。盡管如此,Flu/Glu比為4.53還是說明了它是人工蜂蜜。

蜂蜜5
蜂蜜8沒有用EA法檢測是因為0.3‰的差(摻加1.5%四碳糖)在該方法的不確定度之內。葡萄糖和果糖的δ 13 C差1.3‰清楚地表明該蜂蜜是摻假的。通過比較,Flu/Glu比為2.17還說明添加了含三碳糖的果糖。
用直接循環注射的 μ-EA 法
LC
IsoLink接口使用直接安裝在HPLC色譜柱之后的直接循環注射器,提供了一種快速分析多種樣品的方法。
多樣品的處理方法與HPLC分離化合物的方法一樣。
這種μ-EA法可用于在如下色譜圖中所示的全部可溶性物質的超快多種樣品分析。該方法的優點是直接與某一已知δ 13
C值的標準樣品比較,一次分析循環時間<100秒。
這種相同的技術也可用在每一次HPLC的運行過程中。在分析多樣品的開始或者結束時,可以注射進某些標準物質而幾乎不損失分析時間。 表2是樣品對已知δ
13 C值為-29.9‰的苯甲酸分析的結果。EA法(表1)和μ-EA法的分析結果中平均差為 0.5
‰,這可能是由于所采用的參考間的差異,也可能是因為μ-EA法只分析可溶于水的化合物的原因。

表2 8 種蜂蜜樣品的μ-EA法測量結果