近日，中國科學院上海藥物研究所陳小華課題組與譚敏佳課題組合作，利用前期開發的PANAC光點擊化學，發展了一種在活細胞內直接捕捉“修飾調控酶—底物”相互作用的時空可分辨解析新方法，為蛋白質相互作用和蛋白質翻譯后修飾研究提供了新工具。相關研究發表于《自然—通訊》。
精確解析“修飾調控酶—底物”的動態互作對于深入理解蛋白質功能和靶標發現具有重要意義，但利用現有技術直接進行“修飾調控酶—底物”的時空動態全局性解析，尤其對動態和微弱相互作用產生的修飾底物、修飾位點的準確鑒定，非常具有挑戰性。
作為直接捕捉“修飾調控酶—底物”動態互作策略的概念性驗證，研究團隊基于前期發展的化學生物學工具，發展了一種在活細胞中直接捕捉賴氨酸酰基化修飾酶的全局性底物新方法。通過整合酰基化修飾調控酶的催化機制及在酶活性口袋中定點引入的賴氨酸殘基選擇性交聯的非天然氨基酸，研究人員實現了對多種原核系統的賴氨酸修飾調控酶和真核系統的賴氨酸修飾調控酶底物的直接捕捉和全局性解析，并發現了新底物、新修飾位點和蛋白質新功能。
本工作發展的直接捕捉“修飾調控酶—底物”的新方法 圖片來源于《自然—通訊》
相關論文信息：https://doi.org/10.1038/s41467-024-45765-3