水溶性維生素的測定

　　一、維生素B1的測定

　　VB1又叫硫胺素

　　1、食品中VB1的存在形式

　　⑴ 常以游離態存在；

　　⑵復合脂形式存在（磷蛋白）；

　　⑶ 輔羧酶形式存在

　　VB1在酵母、米糠、麥胚、花生、黃豆以及綠色的蔬菜和牛乳、蛋黃中比較豐富，動物組織不如植物含量豐富。

　　2、VB1的性質

　　⑴ VB1在中性、堿性下不穩定，易分解；

　　⑵ VB1在酸性條件下穩定，即使加熱酸性也穩定；

　　⑶ VB1為白色結晶，微溶于C2H5OH，不溶于乙醚或CHCl3，易溶于水。

　　3、VB1的測定

　　世界各國都用熒光法測定

　　⑴ 原理：硫胺素在堿性鐵氰化鉀溶液中，被氧化成一種蘭色熒光物質，即為硫色素，在紫外光

　　下，硫色素發出熒光。

　　⑵ 方法

　　① 萃取

　　100g樣品于干燥燒杯中，加入100ml0.1N H2SO4，打成勻漿，煮沸30分鐘，稱取一定的樣品經高壓鍋121℃、20分鐘高壓酸解

　　② 水解

　　在酸解的樣品中冷卻后加入含有10%糖化酶的10ml2.5MNaAC溶液，搖勻，用15%NaOH調PH=4.5，用淀粉酶使淀粉水解，也可用磷酸酶使淀粉水解，于50℃恒溫箱中12小時

　　③ 純化

　　采用柱層析提純

　　吸附劑采用的是人造浮石。人造浮石用25%KCl溶液分數次洗滌，主要是把VB1吸附上去，吸附上去后，再用熱水淋洗，最后用25%KCl-HAC把VB1洗脫下來，這樣就得到純VB1，再根據上面的原理在堿性下分析。

　　④ 分析

　　裝填柱子（離子交換柱）→ 提純 → 氧化 → 測定