上海應物所發展出基于酸堿調控的室溫PCR新方法
近日，中國科學院上海應用物理研究所與清華大學合作，發展了一種新型的離子介導聚合酶鏈式反應（Ion-Mediated Polymerase Chain Reaction, IM-PCR），通過精確調控溶液pH值（即質子和氫氧根離子），可以在室溫下完成PCR擴增，相關結果發表于《德國應用化學》（Angew. Chem. Int. Ed.）雜志，并申請了美國和國際ZL。 PCR是體外通過酶反應合成、高靈敏擴增目標基因片段的一種方法，是最常用的分子生物學技術之一。常規PCR是通過控制溶液溫度來實現DNA分子的可逆變復性，從而達到復制擴增的目的。而這種升降溫過程通常需要復雜的控溫裝置并消耗大量能源。從理論上來說，DNA變復性還可以通過酸堿變性來實現，然而如何在不改變溶液體積的情況下精確控制溶液pH值則是一個難題。上海應物所物理生物學研究室樊春海課題組與清華大學化學系劉冬生課題組合作，建立了一種基于微流控的電化學芯片，可以通過電壓驅動......閱讀全文
免疫PCR(IMPCR)注意事項
免疫PCR(IM-PCR)注意事項???? (1)固相載體的選擇：主要取決于抗原在固相載體上的吸附程度。如果抗原吸附良好，可以進行IM-PCR。如果抗原吸附不良，則需選用雙抗體夾心IM―PCR。另外選用的固相載體要和PCR儀器相匹配。一般用0.5ml的塑料反應管，也可以用微量滴定板。???? (2)
上海應物所發展出基于酸堿調控的室溫PCR新方法
近日，中國科學院上海應用物理研究所與清華大學合作，發展了一種新型的離子介導聚合酶鏈式反應（Ion-Mediated Polymerase Chain Reaction, IM-PCR），通過精確調控溶液pH值（即質子和氫氧根離子），可以在室溫下完成PCR擴增，相關結果發表于《德國應用化學》（An
免疫PCR[ImPCR,－Immuno－PCR]基本原理、試驗程序和操作方法2
4DNA和PCR系統 免疫PCR中的DNA是一指示分子，用DNA聚合酶將結合于固相上的DNA特異放大，由此定量檢測抗原。免疫PCR的敏感性高于ELISA主要是應用了PCR強大的擴增能力。免疫PCR中的DNA分子可以選擇任何DNA，但要保證DNA的純度，且有較好的均質性，盡可能不選用受檢樣品
免疫PCR[ImPCR,－Immuno－PCR]基本原理、試驗程序和操作方法3
3)抗原抗體反應:用釋釋液1:8000稀釋單克隆抗BSA抗體，每孔加50μl，室溫(～22℃)下45min，洗板孔15次×10min，去除未結合的抗體分子。4)鏈親合一蛋白A結合反應:每孔加入50μl用稀釋液稀釋的已與生物素-pUC19結合的鏈親合素-蛋白A嵌合體，室溫(～22℃)50min，使得嵌
免疫PCR[ImPCR,－Immuno－PCR]基本原理、試驗程序和操作方法4
3 PCR產物的檢測與定量技術 1）凝膠檢測系統 用凝膠掃描儀或計算機輔助視頻設備對溴化乙錠染色的瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠進行定量，放射性標記的擴增產物可通過放射自顯影定量測定，最近用自動DNA 測序儀檢測熒光標記的核酸，這種方法可準確測量擴增產物的大小，而且其檢測靈敏度達fg水平，
免疫PCR[ImPCR,－Immuno－PCR]基本原理、試驗程序和操作方法1
一、定義；免疫PCR是利用抗原抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術。用抗體檢測抗原是免疫學的最基本方法，用酶或同位素標記抗體可使檢測的敏感性提高，常用的定量檢測方法ELISA和RIA均基于標記分子可以使檢測的信號增強。免疫PCR是在ELISA的基礎上建立起來的新方
免疫PCR
免疫PCR (Immuno PCR, Im-PCR) 是利用抗原抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術。是用一段已知DNA分子標記抗體作為探針，用此探針與待測抗原反應，PCR擴增粘附在抗原抗體復合物上的這段DNA分子，電泳定性，根據特異性PCR產物的有無，來判斷待測
免疫PCR的基本原理
??? 免疫PCR的基本原理1.定義??免疫PCR（immuno polymerase chain reaction,IM-PCR）是1992年Sano建立的一種檢測微量抗原的高靈敏度技術。該技術把抗原抗體反應的高特異性和聚合酶鏈反應的高敏感性有機結合起來，利用抗原抗體反應的特異性和PCR擴增反應的