化學發光免疫分析法幾個常見問題及處理辦法
化學發光免疫分析法( CLIA )是將化學發光與免疫反應相結合而建立起來的用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫分析技術。這種方法兼有發光分析的高靈敏度和抗原抗體反應的高特異度,并且具有無放射性危害、自動化程度高等優點,目前已趨于代替放射免疫分析( RIA )和酶聯免疫測定( EIA )而成為臨床免疫檢測中應用最廣泛的分析技術 。筆者從事 CLIA 免疫檢測10余年,遇到過許多問題,現把日常工作中幾個常見問題和處理辦法進行總結如下。 1,鉤狀效應 “鉤狀效應”是指免疫檢測中使用雙抗體夾心法時,抗原抗體反應在比例適中時形成的檢測信號與所測的抗原或抗體水平呈正比關系,但當抗原或抗體的水平超過一定界限時,檢測信號反而隨著水平的增加而下降的現象。CLIA 本質上還是利用抗原抗體反應原理對微量物質進行檢測,所以同樣存在鉤狀效應的問題。在 CLIA 免疫檢測中,最容易出現鉤狀效應的檢測項目包括甲胎蛋白(AFP)、催乳素(PRL......閱讀全文
化學發光免疫分析法幾個常見問題及處理辦法
化學發光免疫分析法( CLIA )是將化學發光與免疫反應相結合而建立起來的用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫分析技術。這種方法兼有發光分析的高靈敏度和抗原抗體反應的高特異度,并且具有無放射性危害、自動化程度高等優點,目前已趨于代替放射免疫分析( RIA )和酶聯免疫測定( EIA )而成
液相色譜常見問題及處理辦法
一、問:用HPLC進行分析時,保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決??關于漂移問題:?1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定。?2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。?3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡。?關于快速變化問題:?
液相色譜常見問題及處理辦法
問:用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?答:關于漂移問題:1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡 關于快速變化問題 1. 流速發生變化
液相色譜常見問題及處理辦法
一、問:用HPLC進行分析時,保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?關于漂移問題:1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定。2. 流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等。3. 柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡。關于快速變化問題:1. 流速發
化學發光免疫分析法類型
化學發光免疫分析法以標記方法的不同而分為兩種:(1)化學發光標記免疫分析法;(2)酶標記、以化學發光底物作信號試劑的化學發光酶免疫分析法化學發光標記免疫分析化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA ) , 是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶
Access全自動微粒子化學發光免疫分析儀常見問題及處理
美國Beckman Coulter公司和法國Pasture研究院合作生產的Access全自動微粒子化學發光免疫分析儀,其方法學具有高靈敏性、高精確性、高穩定性等特點,及時排除故障,精心維護儀器是檢驗地帶網確保該儀器發揮應有作用的關健。我們在4年多的使用過程中,對一些常見問題及處理方法進行了總結,現報
化學發光免疫分析法的優勢
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段,由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。化學發光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶聯免疫分析(enzymeimm un
化學發光標記免疫分析法
化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA ) ,是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的發光標記物[ 3 ] , 其通過起動發光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發光
化學發光免疫分析法的原理
1、直接化學發光,標記物為吖啶酯(雅培)或者abei(新產業)2、酶促化學發光,標記物為堿性磷酸酶(廈門波生)或者辣根過氧化物酶(強生)3、電化學發光,標記物為三聯吡啶釕(羅氏)
化學發光免疫分析法的優點
1、靈敏度高 靈敏度高是化學發光免疫分析關鍵的優越性,其靈敏度可達 10-22 mol/L ( RIA 為10 -12 mol/L )。化學發光免疫分析能夠檢出放射免疫分析和酶聯免疫分析等方法無法檢出的物質,對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。 2、寬的線性動力學范圍 發光強度在 4 ~
化學發光免疫分析法的原理
1、直接化學發光,標記物為吖啶酯(雅培)或者abei(新產業)2、酶促化學發光,標記物為堿性磷酸酶(廈門波生)或者辣根過氧化物酶(強生)3、電化學發光,標記物為三聯吡啶釕(羅氏)
化學發光免疫分析法的優勢
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段,由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。化學發光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶聯免疫分析(enzymeimm unoassa
化學發光免疫分析法的原理
1、直接化學發光,標記物為吖啶酯(雅培)或者abei(新產業)2、酶促化學發光,標記物為堿性磷酸酶(廈門波生)或者辣根過氧化物酶(強生)3、電化學發光,標記物為三聯吡啶釕(羅氏)
化學發光標記免疫分析法
化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA ) ,是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的發光標記物[ 3 ] , 其通過起動發光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發
化學發光免疫分析法的優勢
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段,由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。化學發光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶聯免疫分析(enzymeimm un
化學發光免疫分析法的優勢
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段,由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。化學發光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶聯免疫分析(enzymeimm unoassa
化學發光免疫分析法優勢淺談
眾所周知,國內IVD市場對免疫類檢測需求量日益增大,各類免疫檢測類產品層出不窮,化學發光作為一種檢測結果較為準確的方法學,已逐漸替代ELISA免疫檢測。化學發光免疫分析法(CLIA)是近三十年來迅速發展起來的非放射性免疫分析方法,是繼酶免技術(EIA)、放射免疫技術(RIA)和熒光免疫技術(FIA)
化學發光、免疫分析常見問題匯總
答:皰疹病毒是一種存在包膜構造的雙鏈DNA病毒, 大量生存于自然界內, 可侵入人體和動物體會發生感染, 病毒通常經由黏膜、皮膚、神經組織等感染機體而致相關的病變。其可分成HSV-1與HSV-2兩種血清類型,感染HSV-1后主要會導至咽炎、唇皰疹、角膜炎, 嚴重者會造成散發性腦炎等危險疾病
化學發光免疫分析法的類型介紹
化學發光免疫分析法根據標記物的不同可分為三大類,即化學發光免疫分析、化學發光酶免疫分析和電化學發光免疫分析法。
化學發光免疫分析法具有的優勢
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段,由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質、激素等微量物質。化學發光免疫分析方法是在放射免疫分析(Radioimmunoassay, RIA)和酶聯免疫分析(enzymeimm unoassa
旋光儀常見問題和處理辦法
?1.?旋光儀損壞頻率高:①儀器應安放在干燥的地方,防止潮濕發霉,以免對電路和光學系統受損。避免經常接觸腐蝕性氣體,防止受到劇烈的振動。電源要穩定(zui好有穩壓電源)。②打開電源開關,在測樣前讓儀器預熱穩定。使鈉燈發光穩定。測量前打開光源開關(此時鈉燈在直流供電下點燃),然后測量樣品。③樣品集中一
旋光儀常見問題和處理辦法
1.?旋光儀損壞頻率高:①儀器應安放在干燥的地方,防止潮濕發霉,以免對電路和光學系統受損。避免經常接觸腐蝕性氣體,防止受到劇烈的振動。電源要穩定(有穩壓電源)。②打開電源開關,在測樣前讓儀器預熱穩定。使鈉燈發光穩定。測量前打開光源開關(此時鈉燈在直流供電下點燃),然后測量樣品。③樣品集中一起測定。減
旋光儀常見問題和處理辦法
?1.?旋光儀損壞頻率高:①儀器應安放在干燥的地方,防止潮濕發霉,以免對電路和光學系統受損。避免經常接觸腐蝕性氣體,防止受到劇烈的振動。電源要穩定(有穩壓電源)。②打開電源開關,在測樣前讓儀器預熱穩定。使鈉燈發光穩定。測量前打開光源開關(此時鈉燈在直流供電下點燃),然后測量樣品。③樣品集中一起測定。
長片段PCR擴增中幾個常見問題的解決辦法!
1.當PCR結果不滿意時,考慮以下幾個方面:(1)將PCR反應的試管與反應板緊貼,(2)使用50ul或更少反應體系時,勿使用AmpliWax,兩個反應混合液=的操作方式在大多數情況下很有效,(3)當酶反應混合物以70度"熱啟動"開始循環時,切記在加入酶后稍微振蕩一下,因為在0.2ml的PCR管不能均
化學發光免疫分析法有哪三類
1、直接化學發光,標記物為吖啶酯(雅培)或者ABEI(新產業)2、酶促化學發光,標記物為堿性磷酸酶(廈門波生)或者辣根過氧化物酶(強生)3、電化學發光,標記物為三聯吡啶釕(羅氏)
免疫組化常見問題及其解決辦法
1、 一抗從4度拿出后,為什么要進行37度復溫?(1)一方面,防止切片從4度直接放入PBS易脫片;(2)另一方面,使抗原抗體結合更穩定。一般不需要,但對表達較弱的抗原可能有用,4度和37度時分子運動方式不同,前者分子碰撞機率和運動速度小于后者,后者結合更快,但敏感性也提高了并易造成非特異染色。(3)
氮吹儀的幾個常見問題及回答
氮吹濃縮儀因其在用于液相、氣相及質譜分析中的樣品制備試驗中,氮吹濃縮儀能夠迅速將氮氣吹入加熱樣品的表面進行樣品濃縮,具有省時、操作方便、容易控制等特點,而廣泛應用于農殘分析、環境、生物制品、食品、制藥等行業中。為氣相色譜儀(GC)、液相色譜儀(HPLC)等分析手段中樣品的制備和處理提供了省時高效的平
化學發光底物檢測方法結果陰性的原因和處理辦法
更換其它二抗,再次進行檢測;再次檢測結果仍為陰性,證明底物喪失活性。
化學發光底物檢測方法結果陽性的原因和處理辦法
認為二抗及底物活性良好; Western Blot 系統需要進一步優化 優化抗原和抗體濃度的斑點雜交方法:斑 點 雜 交 方 法——優 化 抗 原 和 抗 體 濃 度 對于一個給定的抗原,抗體濃度依賴的抗原和抗體本身。抗原和抗體的親和力,以及一抗與二抗的特異反應都是不同的。抗原和抗體濃度可通