腫瘤治療新技術:不可逆電穿孔技術
不可逆電穿孔技術(Irreversible electroporation,IRE)是一種電能產生的生物效應。當細胞暴露于短脈沖的高壓電場時,細胞膜對于離子和大分子的通透性增加,形成納米級孔隙,使細胞內外物質交換程度加大,該效應即為電穿孔。電穿孔可以是可逆的,也可以是不可逆的。特定條件(如極大的電場強度)可使這種通透性的增加成為永久性改變,孔隙會導致細胞內外環境失衡,最終誘導細胞凋亡壞死,被稱為不可逆電穿孔。 不可逆電穿孔技術最早發現于18~19世紀,有科學家發現在萊頓瓶中放置的紅細胞會發生形態改變。20世紀前半葉,陸續有研究者發現,高壓電場可使生物組織的膜結構發生可逆或不可逆的穿孔效應。20世紀中期,可逆電穿孔技術被用于體外DNA電轉移研究和體內電化學療法。20世紀60年代,不可逆電穿孔技術被應用于食品加工領域,利用該技術對細胞的破壞效果進行液體和食物殺菌。隨著該技術在醫學領域的深入研究,不可逆電穿孔技術開始逐步應用于臨......閱讀全文
腫瘤治療新技術:不可逆電穿孔技術
不可逆電穿孔技術(Irreversible electroporation,IRE)是一種電能產生的生物效應。當細胞暴露于短脈沖的高壓電場時,細胞膜對于離子和大分子的通透性增加,形成納米級孔隙,使細胞內外物質交換程度加大,該效應即為電穿孔。電穿孔可以是可逆的,也可以是不可逆的。特定條件(如極大的
電穿孔的
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子,例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明,該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的,所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中,阻擋材料被電離,產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
活體電穿孔法在基因治療方面的應用
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115μm ,這種
喉腫瘤治療
喉腫瘤癥狀 喉的神經支配包括喉上神經,支配環甲肌和咽下縮肌,并含有來自室帶和梨狀窩黏膜的感覺傳入纖維;喉返神經,支配所有的喉內肌,以及聲帶、聲門下區和附近食管黏膜的感覺。喉的正常功能包括保持呼吸道開放、避免氣管支氣管誤吸、提供捏鼻鼓氣和咳嗽時壓力、協助發聲。累及喉部的腫瘤根據其位置
概述活體電穿孔法在基因治療方面的應用
原來在基因治療中利用活體電穿孔法將抗體或化療藥物導入腫瘤中,促進抗體和化療藥物的運送來進行治療,現在則以特異的外源基因替代了抗體的應用,簡化操作步驟同時降低了費用。 首先,在皮膚瘤和腦瘤的治療中,電穿孔法可有效地將藥物基因導入治療部位。電穿孔法導入人單核細胞趨化物蛋白基因到大鼠腦瘤后,該蛋白在
腫瘤治療的“鐵器”時代誘導鐵死亡治療腫瘤
鐵對細胞生長分裂的重要性 鐵元素對細胞生長分裂至關重要。然而由于鐵可以催化生成有毒活性氧(ROS),胞內鐵含量必須嚴格控制。也許由于鐵含量高于正常細胞,快速生長的癌細胞對ROS壓力更敏感。最近,兩篇發表在《Nature Nanotechnology》的文章發現了兩種FDA批準用于臨床的納米顆
電穿孔技術簡介
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
電穿孔的概念
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
釀酒酵母的電穿孔轉化法實驗_電穿孔轉化法
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG3350儀器、耗材YPAD 液體培養基渦旋振蕩器實驗步驟1. 將菌株接種 100 ml 的 YPAD 液體培養基,30℃ 振蕩培養過夜,使細胞滴度達到每毫升 1X108?到 2X108?個細胞。2. 3000 g 離心 5 分鐘沉淀細胞,用 100 ml 滅菌水洗兩遍,
什么是細胞電穿孔?
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔轉染-DNA-實驗
電穿孔可以有效地轉染磷酸鈣-DNA 沉淀物等其他方法轉染效果不好的細胞系。但是,與其他轉染方法一樣,未使用過的細胞系進行電穿孔轉染的實驗條件要經過優化。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)下冊,作者:〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒Giem
電穿孔轉染-DNA-實驗
實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液試劑、試劑盒 Giemsa 染液甲醇磷酸鹽緩沖液丁酸鈉載體 DNA細胞生長培養基儀器、耗材 組織培養皿基因脈沖器 II電穿孔設備與電轉化池Sorvall H1000B 轉子或類似設備實驗步驟 材料緩沖液與溶液貯存液、緩沖液與試劑的成分見附錄 1。稀釋貯存液至所需
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115
電穿孔法穩定轉染
? ? ? ? ? ? 實驗材料 L8057-Y10細胞 D-PBSA 儀器、耗材 培養瓶 培養板
電穿孔技術的應用
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法,電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型,包括細菌、酵母、植物和動物細胞;而且,它還能作為注射方法(稱為
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation)是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115
電穿孔的技術簡介
電穿孔或電滲透是微生物學技術,其中將電場施加到細胞以增加細胞膜的滲透性,從而允許化學品,藥物或DNA被引入細胞。在微生物學中,電穿孔過程通常用于通過引入新的編碼DNA來轉化細菌,酵母或植物原生質體。如果細菌和質粒混合在一起后,質粒可以在電穿孔后轉移到細菌中,盡管取決于正在轉移的細胞穿透肽或CellS
電穿孔法穩定轉染
實驗材料L8057-Y10細胞D-PBSA儀器、耗材培養瓶培養板F12 FB培養基G418(Invitrogen)選擇性培養基電穿孔電穿孔專用杯電穿孔儀II電穿孔儀-II配套的效能擴增器-Plus實驗步驟表達載體與 DNA 制備:pSVTKGH,線性化 [ Selden et al.,1986]此載
電穿孔轉染-DNA-實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 指數生長的哺乳動物細胞培養液 試劑、試劑盒 Giemsa 染液 甲醇 磷酸鹽緩沖液
電穿孔技術物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子,例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明,該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的,所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中,阻擋材料被電離,產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔的技術特點
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔技術醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
電穿孔法穩定轉染
方案27.12 脂質體介導的瞬時轉染 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 L8057-Y10細胞 D-PBSA
電穿孔轉染真核細胞實驗——電穿孔轉染哺乳動物細胞
電穿孔法應用高壓電擊短暫或穩定地將DNA導人細胞,是一種目前大受好評的方法。它適用于多數類型的細胞,既可產生高頻率的穩定轉染,又可產生短暫的基因表達,并且由于其所需步驟甚少,因而比其他技術更為容易。實驗材料哺乳動物細胞試劑、試劑盒完全培養液電穿孔緩沖液儀器、耗材電穿孔儀器電擊池實驗步驟1. ?在完全
活體電穿孔法介紹3
肝 臟由于肝臟的生理代謝十分旺盛,因此外源基因在肝臟中的表達時間往往很短暫,而且表達產物的水平也較低。為減少出血,可從小靜脈注入,然后在肝臟上施加電場,能顯著增強基因的表達。睪 丸相對于其他的轉基因方法,活體電穿孔法可使外源基因在睪丸中產生大量和持久的表達。此外,很多研究人員希望利用活體電穿孔法將外
活體電穿孔法介紹(二)
電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時,無法造成細胞膜表面狀態的改變,因而外源D不能進入細胞內。電壓過高時,局部組織積聚過多熱量,造成細胞的死亡或組織失去功能,即使外源基因導入細胞,也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多為20
電穿孔技術的醫學應用特點
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
電穿孔或電滲透的醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
不可逆的電穿孔技術簡介
在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年,一組科學家在