清華大學儀器共享平臺Lcica超簿切片機和制片機
儀器名稱:超簿切片機和制片機儀器編號:97513300產地:德國生產廠家:Lcica型號:ULTRACUT-R出廠日期:199605購置日期:199712所屬單位:生命學院>蛋白質研究技術中心>冷凍電鏡平臺樣品制備>細胞冷凍電鏡平臺放置地點:清華大學生物醫學館U6-106 (何添樓北側地下六層出1號電梯連續2個右拐)固定電話:固定手機:固定email:聯系人:分類標簽:電鏡 電鏡制樣設備技術指標:切片溫度:常溫切片厚度:1nm-15um知名用戶:清華大學、中國農大技術團隊:具有博士學歷工程師1名功能特色:常溫下可以進行半薄切片和超薄切片,切片厚度均一。樣品要求:上機的樣品為已經樹脂包埋好的樣品,樹脂類型不限,包括Epon、LR White、LR Gold、HM20、K4M等預約說明:自主上機需要提前一周預約,提前24小時取消,否則正常計費。項目名稱計價單位費用類別價格備注預約計時切片元/小時自主上機機時費150......閱讀全文
石蠟切片、冰凍切片及振動切片的區別
一、石蠟切片??? 把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上,即可進行切片(section)。切片必須保持切片刀銳利,切片厚度通常為5~7um,也可根據染色需要切成不同厚度,一般不旋轉式切片機超過10um。切好的蠟帶,放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕,切片厚度均一平整。切片如有上述
石蠟切片與冰凍切片
一、組織和細胞標本類型:(一) 組織標本類:1、 石蠟切片:組織形態保存好2、 冰凍切片:抗原性保存好(二)細胞標本類:1、組織印片 2、細胞培養片(細胞爬片) 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后,再進行后固定。2、組織取材注意事項:(1)標本新鮮:組織要求離體后30min
石蠟切片與冷凍切片的區別
1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性,有的抗原不穩定,經過組 織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測的抗原易被破壞,這時只能用冰凍切片來做,檢測這類抗原的一抗只能做冰凍切片, 而那些穩
石蠟切片和冰凍切片的比較
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是今天我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩定,則可作石蠟切片;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片。(2)冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細
連續切片
中文名稱連續切片英文名稱serial section定 義從同一組織包埋塊上連續切成的切片系列。通過對連續切片的分析可構建細胞或組織的三維圖像。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
冰凍切片
實驗概要冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。實驗步驟1. 冷凍切片的制作方法??? 1) 將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內溫度調整到適宜的切溫度,一般情況下為-18~-25℃。??? 2) 在標本冷凍托上涂布一層冷凍包埋劑——OCT
徒手切片
玻片標本的一種。生物實驗中用來觀察形態結構的一種用徒手制作的切片,不需要什么特殊工具和機械設備,而將欲觀察的材料,用鋒利的切片或剃刀切成極薄的薄片,薄片應完全透明,切好后,移置一滴水中,放載玻片上,即可進行顯微觀察。此法適宜觀察新鮮的生物材料,方法簡便,容易掌握。
電鏡所需的切片之超薄切片介紹
超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供電子顯微鏡觀察用的切片。由于電子穿透組織的能力低, 所以供電子顯微鏡觀察用的切片要求極薄(一般厚度為40~50 nm) ,即為超薄切片??。
石蠟切片和半薄切片的制作
實驗概要本方法介紹了石蠟切片和半薄切片的制作流程。主要試劑4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸緩沖液),乙醇,二甲苯,純石蠟,蜂蠟,樹脂膠主要設備真空泵,AO手搖式切片機,Olypmus BH-2型顯微鏡,LKB超薄切片機實驗步驟1. 石蠟切片的制作?? 1) 取材固定新鮮配置4%戊二醛固定液(pH7.
超薄切片技術
在透射電鏡的樣品制備方法中,超薄切片技術是最基本、最常用的制備技術。超薄切片的制作過程基本上和石蠟切片相似,需要經過取材、固定、脫水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步驟。
冷凍切片操作
1.冷凍切片機要始終處于運行狀態,即使在不做冷凍切片時也要開著致冷,不能時開時關,以免影響機器壽命。2.手術取下的新鮮組織不要固定,因固定過的組織不利于切片,而且還會影響染色。3. 用OCT做包埋劑,起到支撐的作用。先將OCT標在固定頭上再將組織放在OCT上,OCT不要太多,以免流到固定頭外,組織表
組織切片機切片邊緣著色的原因分析
原因分析:a組織邊緣與玻片粘貼不牢,邊緣組織松脫漂浮在液體中,導致洗滌不徹底;b切片上滴加的試劑未充分覆蓋組織,邊緣的試劑容易首先變干,濃度較中心組織高而致染色深。解決措施:組織的前期處理應規范,試劑要充分覆蓋組織,盡量避免選用壞死較多的組織。
組織切片機切片背景過深的原因分析
原因分析:a.漂洗不夠;b.切片或涂片過厚;c.蛋白質封閉不夠或所用血清溶血d.使用全血清抗體稀釋不夠;e.底物成色反應過久;解決措施:對一些新的或少用的抗體顯色時進行監控,避免顯色時間過長。
徠卡冰凍式切片機切片制樣方法
電鏡樣品制備技術直接影響樣品的結構和反差。制備高質量的超薄切片,是發揮透?射電子顯微鏡優良性能的前提。透射電子顯微鏡的分辨率理論上可達到o.3nm左右,?但是六于樣品制備技術的限制,分辨率很難達到理論值。對于生物樣品來說,一般只能?達到2nm的水平。?高質量的超薄切片基本特征:①樣品應該能耐受電子束
振動切片方法及與石蠟、冰凍切片的比較
振動切片用振動切片機,可以把新鮮組織(不固定不冰凍)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反應板進行免疫組織化學染色,然后在解剖顯微鏡下檢出免疫反應陽性部位,修整組織進行后固定,最后按電鏡樣品制備、脫水、包埋、超薄切片、染色觀察等。組織不冰凍,無冰晶形成和組織抗原破壞,在免疫組化染色前避免了組織脫水、透
石蠟切片與冷凍切片的區別是什么
1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性,有的抗原不穩定,經過組 織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測的抗原易被破壞,這時只能用冰凍切片來做,檢測這類抗原的一抗只能做冰凍切片, 而那些穩
石蠟切片與冷凍切片的區別是什么
1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關鍵取決于所要檢測的抗原穩定性,有的抗原不穩定,經過組織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測的抗原易被破壞,這時只能用冰凍切片來做,檢測這類抗原的一抗只能做冰凍切片,而那些穩定的
石蠟切片如何檢測線粒體功能需要多少石蠟切片
線粒體有關的腦組織染色問題(線粒體,腦組織,石蠟切片,認知功能,心理)] 本人心理專業,研究認知功能方面,無奈需要生理的指標,因此對動物認知相關的腦區進行取材,主要想測線粒體功能和形態方面的指標。可是本人對這方面一竅不通,急需大家伙幫忙。我現在把組織分為兩組進行處理,一部分-80冷藏了,好像是做分子
組織切片機所有切片呈陰性的原因分析
原因分析:a.緩沖液內含疊氮化鈉,抑制酶的活性;b.染色未完全按照操作步驟進行;c.漏加一種抗體或抗體失活;d.復染或脫水劑使用不當;e.底物中加入的過氧化氫少或失活。解決措施:設立“陽性對照”。如果陽性對照有了表達,說明染色的全過程和所有試劑都沒有問題。如果此時測試片仍為陰性,便是真實的陰性,說明
組織切片機所有切片呈陽性的原因分析
原因分析:a緩沖液配置中未加氯化鈉和PH值不準確,洗滌不徹底;B使用已變色的呈色第五溶液,或呈色反應時間過長;C過氧化氫濃度過高,呈色反應過快且粘附劑太厚;D切片在染色過程中抗體過濃,或干片了;E抗體孵育時間過長。解決措施:縮短抗體孵育時間和呈色反應時長,染色過程中防止出現干片情況。
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的,具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求,冰凍片要求較高(低溫環境,液氮,冰凍切片機,OCT包埋劑等等),石蠟片的制作就比較簡單,試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話,一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話,都可以的,冰凍切片比較容
冰凍切片固定實驗
實驗材料 冰凍組織試劑、試劑盒 PFAPBS乙醇儀器、耗材 加濕盒實驗步驟 1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2. ?吸去固定液,用毛細吸管或用噴水瓶以3×PBS沖冼切片,
冷凍組織切片制作
實驗試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過氧化物酶標記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實驗設備載玻片,Whatman 1#濾紙,低倍光學顯微鏡實驗材料未受損傷的組織
超薄切片的制備
制備超薄切片的設備為超薄切片機,使用的刀為玻璃刀或鉆石刀。為了能切成薄片,包埋標本的包埋劑一定要達到一定的硬度,通常是用樹脂聚合包埋。方法與步驟:鋨酸和戊二醛固定樣品→丙酮逐級脫水→環氧樹脂包埋_→以熱膨脹或機械伸縮的方式切片_→重金屬(鈾,鉛)鹽染色.
冰凍切片的定義
冰凍切片(frozen section)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度,然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便,而多應用于手術中的快速病理診斷。冰凍切片的種類較多,有低溫恒冷箱冰凍切片法,二氧化碳冰凍切片法,甲醇循環制冷冰凍切片法等。這些方法,隨著時代的變遷,科技的發展
冰凍切片的應用
(1)在手術進行中,突然發現病人的病變與原診斷,原定手術方案不相符合,或者懷疑時,需要病理確定。 (2)了解淋巴結內是否有轉移的腫瘤細胞,或者轉移的程度,以利于確定是否需要徹底掃除淋巴結或者其它的治療措施。 (3)對于已確定為惡性腫瘤的患者,則需要了解其手術范圍是否足夠,上下切緣是否有殘存的
超薄切片技術簡介
由于電鏡產生的電子束穿透能力很弱,必須把標本切成厚度小于0.1um以下的薄片才適用,這種薄片稱為超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射電鏡的樣品制備方法中,超薄切片技術是最基本、最常用的制備技術。超薄切片的制作過程基本上和石蠟切片相似,需要經過取材、固定、脫水、浸透、包埋聚合、切片及染
組織切片Masson染色
Masson染色是利用兩到三種陰離子染色液對組織中的纖維和炎性因子著色的染色方法,染色后可使膠原纖維、粘液、軟骨呈藍色,肌纖維、胞漿呈紅色,細胞核呈藍黑色 一、實驗用品 組織蠟塊、蘇木素染液、鹽酸酒精分化液、麗春紅酸性復紅液、苯胺藍染液、1%磷鉬酸、2%冰醋酸、0.2%冰醋酸、梯度乙醇、二甲
冰凍切片固定實驗
實驗方法原理原位雜交中所用冰凍切片必須用多聚甲醛固定,然后再脫水。實驗材料冰凍組織試劑、試劑盒PFAPBS乙醇儀器、耗材加濕盒實驗步驟1. ?將承有切片的載玻片放入加濕盒中,加4%PFA覆蓋整個切片,蓋上加濕盒,如為預先未固定過的組織,則于室溫放置20 min,如是固定過的組織則放置5 min。2.
電鏡超薄切片流程
超薄切片流程包括以下幾個步驟:?1、切片前的準備:銅網清洗(用丙酮和乙醇浸洗)?2、支持膜制備:常用Formvar膜(用聚乙烯醇縮甲醛和氯仿配置,濃度為0.5%)?3、玻璃刀制備:專用制刀機制作。?4、半薄切片光鏡定位(主要確定超薄切片的位置)。?5、修塊(表面修成梯形或長方形)。?6、超薄切片:專